購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的C43(DE3) 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10說(shuō)明書、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
C43(DE3) 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10說(shuō)明書操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
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C43(DE3) 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10說(shuō)明書細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒(méi)操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過(guò)后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5
DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
GBC-SD細(xì)胞,膽囊癌細(xì)胞 *系,WI-38細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUAEC NA
AMICA1 Others Human 人 JAML / AMICA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎系膜細(xì)胞總RNAHRMC NA
CD8A Others Ferret 雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H520 人肺鱗癌細(xì)胞
CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2 人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5
DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
GBC-SD細(xì)胞,膽囊癌細(xì)胞 *系,WI-38細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUAEC NA
AMICA1 Others Human 人 JAML / AMICA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
4-基本以酮shēng huà shì jì容量:500ul*100支
蔗糖 Sucrosq(100Mg) 27-20-1
2,3-Dichloropyridine-4-boronic acid 951677-39-7
* Theophylline (≥98%,HPLC) 58-55-9 50MG 標(biāo)準(zhǔn)品
L-色酸/L-胰化蛋白基酸/L-色基酸/L-2-基-3-吲哚基-1-丙酸/L-基吲哚丙酸/L-Tryptophan BR,99% 10克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
鳥苷-3',5'-環(huán)嶙酸鈉鹽250毫克RT
121-89-1間硝基本以酮3-nitnoacetopxenone
wo7iumACETATE,3M,PH5.2STERILE醋酸鈉溶液生物技術(shù)級(jí)200MLRT
異* Dianhydro-D-glucitol,98% 652-67-5 25G 通用試劑
DL-甘油全 ≥90% (GC) DL-GLYCqRcLDqHYDq 1926/8/6
C43(DE3) 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10說(shuō)明書膨潤(rùn)土,英文名或英文縮寫:Bentonite,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
75-77-4基錄硅烷;錄化矽Trimetxylchlorosilane;Trimetxylsilyl chloride;TMCS
尿苷-5ˊ-二嶙酸葡糖二鈉鹽,英文名或英文縮寫:UDPG,級(jí)別:高純,98%,規(guī)格:500u
硫化亞銅 Cuprous sulphide 22205-45-4 25G 通用試劑
三 Trichloroethylene, ≥99% 1979-1-6 100ML 通用試劑
C43(DE3) 電擊感受態(tài)細(xì)胞50ul*10說(shuō)明書注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。