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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-19 14:44:01瀏覽次數(shù):674次
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Real-Time PCR 稀釋液1mL實(shí)驗(yàn)方法運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
Real-Time PCR 稀釋液1mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹:
Real-Time PCR 稀釋液1mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專(zhuān)一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專(zhuān)一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖級(jí)別〗:FMP
分光有效〖含量〗:≥90.0
層析試驗(yàn):合格
薄層層析試驗(yàn):合格
干燥失量:≤5.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:微紅至深棕色粉末。遇氫氧成淺紫色,在硫酸中為棕色溶液。溶于乙醇和水。zui大吸收波長(zhǎng)518nm。有刺激性。文獻(xiàn)上也有指本品為中性紅(Neutral red)的
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)結(jié)締組織細(xì)胞核染色。測(cè)定鈣的試劑
〖保存〗:RT,避光
8-苯胺-1-萘磺酸
〖英文名稱〗:ANSA;1,8-ANS ;8-Anili-naphthalenesulfonic acid;N-Phenyl-1-naphthylamine-8-sulfonic Acid;Phenyl Acid;N-Phenyl peri acid
〖其他名稱〗:N-苯基-8-萘胺-1-磺酸;8-苯氨基-1-萘磺酸;8-苯胺基-1-萘磺酸;N-苯基-1-萘胺-8-磺酸;N-苯基周位酸;苯基-1-萘胺-8-磺酸;苯基周位酸
〖CAS號(hào)〗:82-76-8
C16H13NO3S=299.34
〖級(jí)別〗:BR
純度:≥98.0%
〖熔點(diǎn)〗:215~217℃
Insolubles in diluted ammonia:≤0.3%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:灰色至暗綠色或色粉末。其鈉鹽為淺綠色至灰色針狀或片狀結(jié)晶,不溶于水,溶于乙醇
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)1,8-ANS 是一種熒光染料,對(duì)蛋白質(zhì)的疏水表面具有高親和力。1,8-ANS經(jīng)歷藍(lán)移和熒光強(qiáng)度顯著增加后,結(jié)合到低極性區(qū)域的蛋白質(zhì)表面。這些屬性使1,8 - ANS 非常適合用于測(cè)定親和力的疏水性配體及其相應(yīng)的結(jié)合蛋白,如具有疏水性的游離脂肪酸的脂肪酸結(jié)合蛋白(FABPs)
〖保存〗:RT
鉍試劑Ⅰ
〖英文名稱〗:DMTD ;Bismuththiol Ⅰ;,3,4-Thiadiazole-2,5-dithiol;2,5-Dimercapto-1,3,4-thiadiazole
〖其他名稱〗:2,5-二巰基-1,3,4-硫代二氮唑;二硫醇硫代二氮唑;二巰基噻二唑;2,5-二巰基噻二唑;二硫基硫代二唑;2,5-二巰基-1-硫-3,4-二氮茂;1,3,4-噻唑烷-2,5-二硫酮;2,5-二巰基-1,3,4噻二唑
〖CAS號(hào)〗:1072-71-5
C2H2N2S3=150.25
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色針狀結(jié)晶或粉末。易溶于乙迷和堿溶液,微溶于乙醇,不溶于水、氯方和苯。堿性溶液不穩(wěn)定,久置有硫析出。有刺激性。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)檢定鉍、銅、〖鉛〗、鈀和銻。光度測(cè)定鉍和鈀。鉍的容量測(cè)定
〖保存〗:RT,避光。保質(zhì)期5年
超雜交液 B(含甲酰胺) M13mp18DNA
96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 ) φX174RF Ⅰ DNA
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 ) φX174RF Ⅱ DNA
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5 DAPI 干粉
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 ) 碘化丙啶干粉
96 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 ) Hoechst33258 干粉
96 孔板血液 DNAout( 真空法 ) Hoechst33342 干粉
96 孔板血液 DNAout( 真空法 ) WST-1 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 ) Furin 蛋白酶
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 ) 二硫鍵異構(gòu)酶,人
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 ) 超氧化物歧化酶,人
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 ) 硫氧還蛋白
dITP 溶液,100mM
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