| 上海懋康生物科技有限公司
主營產品： 硫酸諾爾斯菌素,D-熒光素,雷帕霉素 |
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更新時間：2024-04-08 14:40:27瀏覽次數：674
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SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO)
RNA凝膠染料
產品標簽
SYBR Green II；GoldView；Acridine Orange 吖啶橙；GelRed； GelGreen；溴化乙錠（EB）；SYBR Green I；
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料 | MF0752-100UL | 100µl | 780 |
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料 | MF0752-500UL | 500µl | 2950 |
產品描述
SYBR Green II是目前已知電泳凝膠中RNA檢測較靈敏的染料之一，在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中低檢到100pg RNA或ssDNA的單一條帶（使用254nm紫外反射光源照射，并用寶麗來667黑白膠片和SYBR濾光片拍照）。即使用300nm透射光也能檢測到500pg RNA的單一條帶。SYBR Green II的靈敏度明顯強于溴化乙啶（EB）。標準瓊脂糖迷你膠EB低檢出1.5ng單鏈核酸的單一條帶（使用300nm透射光照射并用橙-紅明膠濾光片拍照）。
SYBR Green II在變性瓊脂糖/甲醛凝膠和聚丙烯酰胺/尿素凝膠中的檢測靈敏度有點降低，然而仍優于EB。為了獲得大的檢測靈敏度，瓊脂糖/甲醛凝膠必須在EB染色前清洗數小時。相反，不做任何的清洗或脫色步驟，用SYBR Green II染色的瓊脂糖/甲醛凝膠或聚丙烯酰胺/尿素凝膠能檢測到1ng RNA單一條帶（254nm反射照明）和4ng RNA單一條帶（300nm透射照明）。SYBR Green II在RNA檢測具備這一靈敏度的特性歸因于幾個因素，包括*的熒光量子產量、結合能力和熒光增強。
本品為溶于DMSO 的10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料，可用于：1）Northern Blot、起始位點作圖或cDNA制備前對RNA產物的小量分析；2）高分辨率變性梯度凝膠電泳（DGGE）后對5S rRNA遷移方式的觀察；3）單鏈構象多態性（SSCP）中的DNA染色；4）PCR擴增前對DNA染色。
注意事項
必須警告用戶注意，目前尚無關于SYBR Green II 對人體的致突變性或毒性的數據。由于該染料與核酸結合，應當被看作潛在誘變劑，使用時要小心謹慎。在處理DMSO儲存液時應特別小心，因DMSO能促進有機分子進入組織。強烈建議處理DMO儲存液需戴雙層手套。和所有的核酸染料一樣，含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿過活性炭再丟棄。活性炭之后必須焚燒來破壞染料。
SYBR Green II可通過乙醇沉淀法從核酸中去除。異丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯萃防取和酚萃取法無法有效去除該染料。
先用EB染色的凝膠可接下來用SYBR Green II染色，根據電泳后染色（post-staining）的標準步驟操作。與直接用SYBR Green II染色相比較可能靈敏度有些降低。
不要在玻璃器皿中稀釋SYBR Green II儲存液，因其會結合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀釋儲存液。
SYBR Green II不會干擾酶反應。
當用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝膠，建議在預雜交液和雜交液內加入0.1%-0.3% SDS。
不建議用254nm紫外透射儀對凝膠拍照，因紫外光源的輪廓會出現在照片上。需要使用允許525nm光透過且排斥其他波長光的濾光片。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
光譜特征
SYBR Green II RNA核酸染料可用常見的紫外反射和透射激發光源，以及手持式紫外燈檢測。SYBR Green II的大激發波長為497nm，但還有一個二級激發峰集中在254nm附近。與RNA結合的SYBR Green II的熒光發射集中在520nm。這些光譜特性讓SYBR Green II適用于多種凝膠檢測儀，從紫外反射（上紫外）和透射儀（下紫外）到氬離子激光器和水銀燈激發的凝膠掃描儀。
使用方法
一、使用前準備工作
使用前將本品取出并回溫至室溫，使DMSO*解凍、溶液均一。于離心機上短暫離心確保所有溶液到管底。*次使用時可將本品分裝成多個小份后凍存，小份染料能更快溶解。
二、 染色方法
1．電泳后染色（后染，推薦）
2．電泳前染色（預染）
三、 觀察和凝膠成像
3.1 使用300nm紫外透射光或254nm紫外反射光（靈敏度更高）照射染色凝膠。
3.2 為了加靈敏度，建議使用黑白膠片，可用的SYBR Green照相濾光片（Thermo fisher, #S7569）拍照。許多其他的黃色或綠色明膠或玻璃紙濾光片也能用來拍照，但絕大多數可能會減低靈敏度。EB染色凝膠拍照用的橙-紅濾光片不適合于SYBR Green II染色凝膠。
3.3 用的SYBR Green照相濾光片（Thermo fisher, #S-7569）和Polaroid 667黑白膠片對凝膠進行拍照。染色凝膠基本無背景熒光，當檢測少量RNA，允許長期膠片曝光。對于300nm透射，通常F-stop設置4.5時曝光1-2s足夠。對于254nm反射（特別是手持燈），大約需要曝光1-1.5min以得到大靈敏度。
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貨號 | 名稱 | 規格 |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料 分子生物學
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