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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)其他
所 在 地上海市
更新時間:2022-05-30 10:40:44瀏覽次數(shù):1068次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)貨號 | BJ-01X7218 |
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:tubulin抑制劑(Mertansine)
英文名稱:Mertansine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
產(chǎn)品貨號:BJ-01X7218
英文名稱:Mertansine 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg Mertansine是一個tubulin抑制劑,能夠通過綁定tubulin抑制微管蛋白的組裝。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :139504-50-0 別名:DM1;Maytansinoid DM1 純度:98.51% 分子量:738.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
Herba scutellariae barbatae半枝蓮染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周phospho-Caveolin-2(Tyr19) 磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mumps Virus(MV)腮腺炎病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周MCC 大腸瘤突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)青蟹雙順反子病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser967) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Herba portulacae馬齒莧探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周ALDH16A1 乙醛脫16家庭A1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herpes Simplex Virus(HSV)單純皰疹病毒通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周IGF I 胰島素樣生因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Eurytrema ovis羊闊盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Calumenin/CALU 鈣腔蛋白 規(guī)格: 0.1ml
Placenta hominis紫河車LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周GZMA/Granzyme A 顆粒A抗體 規(guī)格: 0.2ml
Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)耐萬古腸球vanA/vanB雙重LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CK7 細(xì)胞角蛋白7抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mecistocirrus digitatus牛捻轉(zhuǎn)胃蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio 標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
Bacteria細(xì)通用染料法qPCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周phospho-RAD9(Ser336) 磷酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格: 0.1ml
tubulin抑制劑(Mertansine)MC培養(yǎng)基(不含瓊脂) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
人抗核仁抗體(ANA)免疫試劑盒*直銷
葡萄糖發(fā)酵管(軍團(tuán)菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
人法尼醇X受體(FXR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
DPD培養(yǎng)基 英文名稱:DPD Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
人Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
犬高遷移率族蛋白A2(HMGA-2)免疫試劑盒*直銷
小鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒*直銷
馬白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠丙酮酸激(PK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
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