基礎假單胞菌瓊脂培養基F 基礎

絕大多數培養基是建立在*(BSS)基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。zui廣泛應用的培養基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規含有無機鹽和代謝添加劑（例如核苷酸）。MEM/F12 這兩種培養基各取1/2，形成神經生物學zui通用的培養基。Dulbecco`s改良培養基——DMEM，現應用于快速生長的細胞，同MEM含有相同的營養成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養基，應仔細了解成分表，應知道大多數情形下培養基都有不足。例如，有些培養基在氨基酸中包括有*，而這種培養基雖廣泛用于神經生物學領域，但它對某些對*敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經元而言，則并非*選擇，特別是如果神經元生長在缺乏膠質的環境中時。F12中含有*，據報道也有神經毒效應。

假單胞菌瓊脂培養基F 基礎制備方法：

1. 培養同源細胞（未克隆前時的同一細胞）至半匯合狀態時，更換一次培養液，再繼續培養24~48小時后，吸出所有培養液。

2. 離心：3000~4000/分離心10分鐘，吸取上清液。

3. 濾過：再經直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾，低溫凍存貯備用；用時取1分適應培養基+2培養基混合使用。

生長因子絕大多數哺乳類胚胎神經元有嚴格的營養要求，若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分，將會使絕大多數神經元在體外培養的數天中死亡。解決這一問題有兩條思路，一是讓培養細胞提供自己的營養因子，二是在假單胞菌瓊脂培養基F 基礎中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長，所需的生長因子便會積累到可觀的數值，尤其當培養基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養需求，可保持培養基在一段時間里不作任何變動，以使營養（生長）因子積累，而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是，這種對營養（生長）因子自身倚賴性亦有弊端，因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖，某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外，這種方法只能進行相當高密度的細胞培養。因為培養基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經元群體的低密度培養可用條件培養基（經過了高密度培養）進行，或在膠質上生長的神經元所用過的培養基來支持。

滿足神經元營養需求的第二條途徑是向培養基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經生長因子NGF。不過，只有少數對這種蛋白質有反應的細胞類型的細胞才能生長。

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hz0930    人甲狀腺鱗癌細胞,SW579 [SW 579; SW-579]細胞
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