細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
兔椎間盤纖維環分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環的前側及兩側較厚，而后側較薄。纖維環的前部有強大的前縱韌帶，后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環細胞密度為9000個細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒，纖維環細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少，纖維環的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。
方法簡介：
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環采用膠原酶-聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環經Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 椎間盤組織 | 產品貨號 | YS-01X7132 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
大鼠巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)試劑盒 ，英文名： MCSF ELISA Kit
Mouse lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PL-A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒
Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFN(HumanFibronectin)ELISAKit人纖連蛋白
細胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續循環比色法定量試劑盒20次
Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規格：96T/48T
小鼠釋放激素 英文名稱： Mouse Gonadoopin-Releasing Hormone 英文縮寫： GH
小鼠葡萄糖氧化酶 英文名稱： Mouse Glucose Oxidase 英文縮寫： GOD
小鼠胰高血糖素 英文名稱： Mouse Glucagon 英文縮寫： GC
小鼠葡萄糖60酸脫氫酶 英文名稱： Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 英文縮寫： G6PD
13號染色體開放閱讀框32抗體
小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒
HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-doublesandedDNA,dsDNA試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒規格：96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感(DTNB)比色法定量試劑盒20次
HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)試劑盒規格：96T/48T
囊泡乙酰通道抗體
CA9重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
OAT-3(Organic anion transporter 3 0.5mgOAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉運蛋白-3(抗原)
CA13重組人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 Protein
EIF5A2 Protein Human 重組人 EIF5A2 蛋白
CTSH Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白
兔椎間盤纖維環細胞OAT-3(Organic anion transporter 3 0.5mgOAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉運蛋白-3(抗原)
EIF5A2 Protein Human 重組人 EIF5A2 蛋白
CA9重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein
CTSH Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白
CA13重組人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
