還原酶底物 Resazurin Sodium Salt
摘要:為分析催化四聯體中關鍵氨基酸突變對黃鱔醛酮還原酶活性的影響,利用重疊PCR對黃鱔Eakr基因進行了A81K定點突變,將突變基因亞克隆至p ET-28a(+)構建了重組表達載體.重組載體轉化BL21(DE3)菌株后經IPTG誘導,鎳離子柱親和層析獲得了突變型蛋白(EakrA81K);以NADPH為輔酶,分析了突變型蛋白EakrA81K的底物譜,并比較了野生型(Eakr)和突變型蛋白(EakrA81K)對不同底物的還原活性;后,以甲醛為底物比較了野生型和突變型蛋白的適反應溫度和適p H.結果表明:EakrA81K對醛類物質以及中長鏈酮類物質具有較高的還原活性,而對醇,糖,酸類物質沒有活性;A81K位點突變使得黃鱔醛酮還原酶和底物之間的親和力增加,并了酶對大部分底物的還原活性;突變稍降低了黃鱔醛酮還原酶的酸度耐受能力但了該酶的溫度耐受能力.這暗示著黃鱔醛酮還原酶Eakr的81位氨基酸在底物識別上具有重要作用.
還原酶底物 Resazurin Sodium Salt
熒光染料resorufin可用于檢測細胞內的還原活性,已用于檢測(1,2)和線粒體代謝活性。瑞蘇林本身在還原為高紅色熒光瑞蘇芬(λEx/λEm:563/587 nm)之前是非熒光的。通常,NADPH或NADH是還原劑,在黃遞酶的存在下將瑞蘇林轉化為瑞蘇芬。因此,resazurin可用于檢測NADH、NADPH或黃遞酶水平。此外,resazurin/黃遞酶/NADPH系統可用于檢測產生NADH或NADPH的生化反應中涉及的生化或酶活性(3-9)。盡管大多數化學品供應商都提供瑞蘇林,但微量的瑞蘇芬污染物往往使材料不適合用于生物測定
名稱:Resazurin,Sodium Salt
形狀:暗固體
溶解性:不溶于二甲基亞砜或水
儲存條件:儲存于4°C,避光
分子式:C12H6NNaO4
分子量:251.17
【類別】:酶底物
【純度】:99%
【說明】:可定制
【貨期】:3天
【廠家】:西安齊岳生物
【圖譜】:提供核磁,HPLC,LCMS,GC圖譜
供應商:西安齊岳生物科技有限公司
溫馨提醒:供科研,不能用于人體實驗
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溫馨提示:西安齊岳生物供應產品用于科研,不能用于人體 zl 02.03