商品介紹：

測定意義

植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分，除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運輸?shù)茸饔猛?，還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。

測定原理

果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇，甲醇與2,4-戊二酮反應(yīng)顯色，在412nm下測定吸光值；同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成5-甲?；?2-呋喃甲酸，5-甲?；?2-呋喃甲酸與3,5-二甲基酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品內(nèi)容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

NADH 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。

NADH 的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>

NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

注意事項：

1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應(yīng)過程要注意避光。

3、當(dāng)吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。

下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

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成纖維生長因子-7/纖維母生長因子 (抗原)Anti-FGF17 Antibody大鼠游離睪酮（F-TESTO）elisa定量檢測試劑盒

成纖維生長因子受體2抗原Anti-FGF18 Antibody豚鼠血小板衍生生長因子AB（PDGF-AB）elisa定量檢測試劑盒

成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8 (抗原)Anti-FGF18 Antibody豚鼠核糖核III（RNASEN）elisa定量檢測試劑盒

谷脫羧-65(C端多肽)Anti-FGFP2 Antibody豚鼠蛋白酪磷受體N（PTPRN）elisa定量檢測試劑盒

半乳糖凝集-3(抗原)Anti-FGFR3 Antibody大鼠胎球蛋白A（FETUA）elisa定量檢測試劑盒

葡萄糖神經(jīng)酰合成（抗原）Anti-FGF20 Antibody大鼠促腎上腺皮質(zhì)（ACTH） elisa定量檢測試劑盒

綠色熒光蛋白Anti-FGF6 Antibody大鼠促血管生成2（ANG2）elisa定量檢測試劑盒