商品介紹：

測定意義

血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力，其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發生密切相關。

測定原理

Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物，在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下，血清轉鐵蛋白可以與Fe3+結合，剩余未結合的Fe3+可以被還原成Fe2+，此時吸光度A1與未結合Fe3+數量正相關；酸化后，轉鐵蛋白結合的Fe3+釋放，并且進一步被還原成Fe2+ ，此時吸光度A2與總Fe3+數量正相關。A2減A1與TIBC濃度呈正比。

自備實驗用品及儀器

天平、可見分光光度計、微量石英比色皿、蒸餾水。
產品屬性：

產品內容：

酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。

NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

注意事項：

1、公司產品僅用于科研操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應過程要注意避光。

3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。

下列是公司正在熱銷的產品：

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血清總鐵結合能力檢測試劑盒微量法溴化 GR鎘標準溶液100ug/mL，基體: 1%硝Anti-ABCF1/FITC  熒光標記ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體IgG

溴化 光譜純SP鎘標準溶液0.100μg/g，基體:K+ 2.2mg/L,Na+ 23mg/L,Ca2+ 39mg/LAnti-ABCG1/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠ABCG1抗體IgG

溴化 99.95% metals basis，無水級，粉末鈷標準溶液 1000μg/mlAnti-ABCG2/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠ABCG2抗體IgG

溴化 99.99% metals basis鈷標準溶液 500mg/L，溶劑：1%鹽Anti-ABCG4/FITC  熒光標記抗ABC膜轉運蛋白抗體IgG

溴化 FT-IR grade, ≥99.5%鈷標準溶液100?g/ml，基體: 1%硝Anti-c-Abl /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠非受體酪激c-Abl抗體IgG

溴化 99.997% metals basis銫標準溶液 1000μg/mlAnti-ABL2/FITC  熒光標記ABL2抗體IgG

溴化 分析標準品，99.94%六價鉻標準溶液 六價鉻標準溶液 1000μg/mlAnti-ACA11 /FITC  熒光標記兔抗擬南芥ACA11抗體IgG

氟化，無水 GR，粉末氯離子標準溶液1000μg/mlAnti-AHA3 /FITC  熒光標記兔抗植物蛋白AHA3抗體（擬南芥）IgG