豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱:Pig blood coagulation factor XIIIA chain (F13A1) ELISA kit
產(chǎn)品貨號(hào):KS17795
品牌名稱:科順生物
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素(INS)水平。用純化的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說(shuō)明書(shū) 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1個(gè) 1個(gè)
酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶標(biāo)試劑 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×濃縮洗滌液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
9.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
豬*XIIIA鏈(F13A1)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS17943 豬游離三dian甲狀腺原氨酸(fT3)ELISA試劑盒
KS17722 豬游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
KS17721 豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
KS13499 豬圓環(huán)病毒(PCV)ELISA試劑盒
KS13938 豬圓環(huán)病毒2型抗原(PCV2 Ag)ELISA試劑盒
KS18160 豬圓環(huán)病毒2型抗原(PCV2Ag)ELISA試劑盒
KS17720 豬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
KS18457 豬孕酮(PROG)ELISA
KS17719 豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)ELISA試劑盒
KS10464 豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
KS17942 豬載脂蛋白A2(APOA2)ELISA試劑盒
KS17941 豬載脂蛋白A4(APOA4)ELISA試劑盒
KS17718 豬載脂蛋白A5(apoA5)ELISA試劑盒
KS17940 豬載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒
KS10782 豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
KS17717 豬載脂蛋白E(ApoE)ELISA試劑盒
KS17716 豬早老素1(PS1)ELISA試劑盒
KS17715 豬早老素2(PS2)ELISA試劑盒
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KS17713 豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA試劑盒
KS17712 豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒
KS17711 豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒
KS17710 豬粘膜血管地址素細(xì)胞黏附分子1(MADCAM1)ELISA試劑盒
KS17709 豬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒
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KS18431 豬脂肪酸結(jié)合蛋白2(FABP2)ELISA
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KS17704 豬脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒
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KS17702 豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
KS13203 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒