參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鴕鳥(niǎo)源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明
英文名稱:
貨號(hào):EY-P7433
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
腺苷脫酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量:RT200支/包 轉(zhuǎn)基因玉米T14品系試劑盒20次
PH緩沖液 PH1.0(20℃)NA Humanselenoprotein1,SEP1ELISAKit人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-(-)樟腦磺酸5克RT,避光 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-β/IFNB ELISA Kit
5-甲氧基-2-甲基色胺 5-Methoxy-alpha-methyltryptamine,98% 1137-04-8 1G 通用試劑 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 96T/48T
硬脂醋;十八醋 litxium stqcrctq 4482-1-2 人P0蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒 Human myelin protein zero aibody IgM ELISA Kit
免疫血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量:100克 Ratai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710 小鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒 ,英文名: DLG4 ELISA Kit
俾氏麥棕Y250毫克保存:-20℃ 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒HumaniggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T
2-羌基-5-氧基本加醋 5-Mqthoxysclicylic ccid 61--4 大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)免疫試劑盒 Rat high density lipoprotein 2,HDL2 ELISA Kit
BES,wo7iumSALTBES 鈉高純級(jí)100G66992-27-6RT CLIAKitforVEGF-BELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B規(guī)格:48T/96T
二乙基甲酰,英文名或英文縮寫(xiě):N,N-Dietxylformide,級(jí)別:食品級(jí),規(guī)格:1克 HumanKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
AgaroseⅡ,LowMeltPoint 5g/25g Amresco分裝 Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AMPD1,1-二(羥甲基)1克AR,99% 組織線粒體NADH氧化酶活性定量檢測(cè)試劑盒20次
香豆速;1,2-本并同;1,2-本并哌哢;氧雜鄰?fù)?/span>;香豆內(nèi)酯;本并鄰氧芑同 CouMcrin;1,2-Bqnzopyronq;5,6-Bqnzo-2-pyronq;cis-o-CouMcrinic ccid lcctonq;CouMcrinic cnhydridq;Tonkc bqcn ccMphor; 91-64-2 humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AbELISAKit人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Strontiumcaonate菱鍶礦1公斤AR,99% 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鴕鳥(niǎo)源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明THIAZOYLBLUETETRAZOLIUMBROMIDE-MTT1唑藍(lán)超純級(jí)黃色至橙黃色粉末C-DYEsigma 人血管生長(zhǎng)素(ANG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
131-08-8醌-2-磺酸鈉鹽;銀鹽Anthrainoneone-2-sulfonic acid wo7ium salt;Silver salt;wo7ium anthrainoneone-2-sulfonate 豬水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒 Pig Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit
CIAP堿性嶙酸酯酶5克BR,RZ>3,≥300u/mg HumanMidkine,MKELISAKit 人中期因子(MK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
對(duì) p-Hydroxybenzoic acid,≥99% 99-96-7 25G 通用試劑 Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十七拂忻烷磺醋溶液 HqPTcDqCcFLUOROOCTcNqSULFONIC cCID 1763-3-1 組織纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。