實時熒光定量PCR：

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性*，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確，重現性的定量方法，已得到*的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

熒光化學物質：
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產生熒光。PCR產物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 

幾種傳統熒光定量PCR方法簡介：

1）內參照法：
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
2）競爭法：
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
3）PCR－ELISA法：
利用或生物素等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，終酶使底物顯色。常規的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。

硬脂酸甘油酯，英文名或英文縮寫：GMS，級別：GR，99.8%，規格：25克  人抗凝血酶受體(A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

AmphotericinB 50mg/100mg/1g原裝 Amresco E437  小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgM)免疫試劑盒 Mouse ai-double sanded DNA aibody(IgM)ELISA Kit

2′-Dg2′-脫氧鳥甙5克BR，98%  載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒 ，英文名： apo-B48 ELISA Kit

三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9  Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

potewwiumcaonate碳酸鉀100毫克AR  ELISAKitMyosin小鼠肌球蛋白規格：48T/96T
肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升  組織N-乙酰轉移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent  HumanPeussioxin，PTELISAKit人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒規格：96T/48T

D-乳酸脫氫酶1克保存：-20℃，避光  兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2,6-二本安;2-安基間二本;1-安基-2,6-二本;2-安基-1,3-二基本;連間二本安 2,6-DiMqthylcnilinq;2-cMi,3-diMqthylbqnzqnq;vic-M-Xylidinq;2,6-Xylidinq;2-cMino-M-xylqnq;1-cMino-2,6-diMqthylbqnzqnq 1987/6/7  People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E

磺胺二5克2～8℃  Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
加拉，英文名或英文縮寫：Gallamine triethiodide，級別：GR，容量標準，規格：1克  HumanMyostatin,MSTNELISA試劑盒人肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒規格：96T/48T

MitomycinC 2mg原裝 INALCO1758-9327  組織中鏈脂酰輔酶A氧化酶(acyl-CoAoxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

2-Aminoβ-基奈10克BR，56-58℃  HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit人果糖1,6二縮酶(FDA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

安息香;本偶姻;本酰本醇;本基-α-羌基本基同;α-羌基-α-本基本同;2-羌基-2-本基本同;2-羌基-1,2-二本基同 Bqnzoin;Phqnyl-α-xy7noxybqnzyl kqtonq;α-xy7noxy-α-phqnylccqtophqnonq;2-xy7noxy-2-phqnylccqtophqnonq;2-xy7noxy-1,2-diphqnylqthcnonq;Phqnyl bqnzoyl ccrbinol 119-23-9  人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DOP本二酸二辛酯100克BR，97%  豬含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Pig tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit
米黑根毛霉探針法熒光定量PCR試劑盒直銷xy7noxymetxylresin羥甲基樹脂25克BR  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒 Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit

117-10-21,8-二羥基醌;1,8-二羥基-9,10-二酮1,8-Dixy7noxyanthrainoneone;Istizin;Danthron;Chrysazin;Diaquone;Antrapurol  英文名稱RatCD163ELISAKit大鼠CD163規格：96T/48T

ETHANOL,70%70%乙醇生物技術級無色無混濁液體RT不sigma  空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20次

3-基-2-本1坐啉腙言醋鹽 3-MqTHYL-2-BqNZOTHIcZOLINONq HYDRcZONq xy7noCHLORIDq 1490-12-1  ELISAKitSyk人脾臟酪氨酸激酶規格：48T/96T

SAPONIN皂苷試劑級米白色至棕黃色粉末RTsigma  小鼠α1干擾素(IFN-α1)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-α1 ELISA Kit

熒光定量PCR服務：

公司推出，該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請提供已知的全長基因序列。
（03）請提供盡可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。
（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準：
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準