產(chǎn)品名稱 | 大鼠大隱靜脈組織提取物說明書 |
英文名稱 | Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Derivatives |
貨號 | EYX99422 |
大鼠大隱靜脈組織提取物【Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Derivatives】
大隱靜脈是長的靜脈,靜脈血管壁薄、內(nèi)腔大,內(nèi)膜折疊形成靜脈瓣。靜脈瓣一般成對排列,呈半月狀小袋,袋口朝向心,利于靜脈回流,防止血液逆流。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠大隱靜脈組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
實驗要點及說明;
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點;
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
CTP 5’-三磷酸胞苷二鈉 mg2-(2-Aminoethyl)-methylpyrrolidine51382-(2-氨乙基)-N-甲基
Cytosine 胞嘧啶 5g2-(2-Aminobenzoyl)-benzoic acid114732-(2-甲酰)-苯甲酸
D-(+)Galactose D-半乳糖 25g 2-(2,2-Dimethyl,3-dioxolan-yl)propane,2-diol1291418
D-(+)-Galacturonic acid D-半乳糖醛酸 1g 1-Testosterone1965/6/51-睪酮
DAB 3,3’-二氨基胺四鹽酸水合物 1g/ 5g1-O-Methylnataloe-emodin33921
Coumarin 6 中文名:香豆素 6 分子式:C20H18N2O2S 度:98.0% 小鼠白介素-17(mouse IL-17) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Benzotetramisole 中文名:苯并四咪唑 分子式:C15H12N2S 度:98.0% 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
Anthraflavic acid 中文名:二羥蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0% 小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid 中文名:1,4-苯并二氧六環(huán)-6-羧酸 分子式:C9H8O4 度:98.0% 小鼠八聚體結合轉錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒
Benactyzine hydrochloride 中文名:鹽酸貝那替嗪 分子式:C20H26ClNO3 度:98.0% 小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒
內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸(>98.0%(T)) meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 人玻連蛋白(VTN)試劑盒 Human vionectin ELISA Kit
吡哆醛-L-谷氨酸二鉀鹽[藥物研究配體] Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA檢測試劑盒Humanvionectin,VELISAKit 96T/48T
吡哆醛-L-異亮氨酸鉀鹽[藥物研究配體] Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體 人補體1q(C1q)ELISA檢測試劑盒HumanCompleme1q,C1qELISAKit 96T/48T
1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N)) 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 人補體1q(C1q)試劑盒 Human Compleme 1q ELISA Kit
己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC)) Bis(2-ethylhexyl) Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit
3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC)) 3,4-Benzopyrene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 人補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)試劑盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit
雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC)) Bis(phenylacetyl) Disulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit
苯并紅紫4B[pH指示劑] Benzopurpurine 4B 質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑 人補體7(C7)試劑盒 Human Compleme 7 ELISA Kit
五甲氧基紅(>98.0%(HPLC)) Pentamethoxy Red 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 人補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白1(C1QTNF1/CP1)試劑盒 Human C1QTNF1 ELISA Kit
苯甲基橙(>95.0%(W)) Benzyl Orange 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W) 人補體蛋白3(C3)試劑盒 Human Compleme 3,C3 ELISA Kit
大鼠大隱靜脈組織提取物說明書組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2,2'-Bicinchoninic acid 1245-13-2 中文名:2,2'-二辛可寧酸 分子式:C20H12N2O4 度:98.0%
組胺(HIS)ELISAKit Albendazole 54965-21-8 中文名:阿苯達唑 分子式:C12H15N3O2S
組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(Phenylmethoxy)-naphthalene 中文名:2-萘酚芐基醚 分子式:C17H14O 度:98.0%
轉化生長因子β1elisa試劑盒 轉化生長因子β1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 轉化生長因子β1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:轉化生長因子β1試劑盒、轉化生長因子β1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Agomelatine 138112-76-2 中文名:阿戈美拉汀 分子式:C15H17NO2 度:98.0% 關鍵詞:
轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 Afatinib 850140-72-6 中文名:阿法替尼 分子式:C24H25ClFN5O3 度:98.0%
運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。