上海古朵生物供應(yīng)糖元 10mg基因組DNA相關(guān)溶液上海古朵生物是一家集研發(fā)、銷售為一體的高新技術(shù)生物企業(yè),公司專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,專業(yè)提供分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生命科學(xué)基礎(chǔ)研究以及臨床檢測(cè)等諸多領(lǐng)域的試劑、耗材、儀器等各類產(chǎn)品及生物技術(shù)服務(wù)。
糖元 10mg基因組DNA相關(guān)溶液
配置溶液的操作步驟:
(1)計(jì)算:計(jì)算配制所需固體溶質(zhì)的質(zhì)量或液體濃溶液的體積。
(2)稱量:用托盤天平稱量固體質(zhì)量或用量筒(應(yīng)用移液管,但中學(xué)階段一般用量筒)量取液體體積。
(3)溶解:在燒杯中溶解或稀釋溶質(zhì),恢復(fù)至室溫(如不能*溶解可適 [1] 當(dāng)加熱)。檢查容量瓶是否漏水
(4)轉(zhuǎn)移:將燒杯內(nèi)冷卻后的溶液沿玻璃棒小心轉(zhuǎn)入一定體積的容量瓶中(玻璃棒下端應(yīng)靠在容量瓶刻度線以下)。
(5)洗滌:用蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒2~3次,并將洗滌液轉(zhuǎn)入容器中,振蕩,使溶液混合均勻。
(6)定容:向容量瓶中加水至刻度線以下1cm~2cm處時(shí),改用膠頭滴管加水,使溶液凹面恰好與刻度線相切。
(7)搖勻:蓋好瓶塞,用食指頂住瓶塞,另一只手的手指托住瓶底,反復(fù)上下顛倒,使溶液混合均勻。
后將配制好的溶液倒入試劑瓶中,貼好標(biāo)簽。
DNA提取方法:
一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎細(xì)胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細(xì)胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))
五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。
優(yōu)勢(shì):
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