產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NADMENAD蘋(píng)果酸酶檢測(cè)試劑盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | FS-01S63249 |
商品介紹:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋(píng)果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋(píng)果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專(zhuān)一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測(cè)定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
公司產(chǎn)品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提?。?/span>
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提取:稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。悍Q(chēng)取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。菏占?500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
兔重去甲腎(NEB)試劑盒Anti-CRY2 Antibody磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
兔糖化白蛋白(GA)試劑盒 Anti-CRYAA Antibody磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
兔嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin)試劑盒 Anti-CSF1 Antibody磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
兔降鈣素受體(CTR)試劑盒 Anti-CSF1 Antibody磷酸化Rad51抗體
兔β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)試劑盒Anti-CSF1R Antibody磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體
兔硒蛋白1(SEP1)試劑盒Anti-CSF2 Antibody磷酸化絲氨激酶p90RSK蛋白抗體
兔肌肉糖原磷酸化酶(PYGM)試劑盒Anti-CSF2 Antibody(PB0047)磷酸化磷酸化酸激酶p90RSK蛋白抗體
兔甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)試劑盒 Anti-CSF3 Antibody磷酸化絲酸激酶p90RSK蛋白抗體
兔血幼素(HJV/HFE2)試劑盒 Anti-CSF2RB IL3RB IL5RB AntibodyRNA結(jié)合基因蛋白3抗體
兔αL艾杜糖酸酶(IDUα)試劑盒 Anti-CSF3 Antibodyras癌基因家族Rab5蛋白抗體
兔Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)試劑盒Anti-CSF3R Antibodyras癌基因家族Rab11蛋白抗體
兔干因子(SCF)試劑盒Anti-CSK Antibody視黃結(jié)合蛋白4抗體
兔S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)試劑盒 Anti-CSNK1A1 Antibody胰島再生因子ICRF抗體
兔Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1/BCL-X)試劑盒Anti-CSK Antibody(PB0129)腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體
兔甘露糖受體C1(MRC1)試劑盒 Anti-CST3 Antibody分泌性蛋白R(shí)SPO1抗體
NADMENAD蘋(píng)果酸酶檢測(cè)試劑盒紫外分光光度法豬胰島素單克隆抗體Human SAA4(Serum amyloid A-4 protein) ELISA Kit神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(抗體流式組化)
KB抑制蛋白激酶α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體Human RAB11FIP3 ELISA Kit丙型肝炎病核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體流式組化
抗重島素抗體Human ENPP1(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 1) ELISA Kit白介素12抗體流式組化(白介素-12)IHC WB
磷酸化肌聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體Human RAB11FIP5 ELISA KitDL-組酸鹽酸鹽
胰島素受體抗體Human PVRL4 ELISA KitL-焦谷
胰島素受體α抗體Human PXMP2 ELISA KitL-甲狀腺素
胰島素受體β抗體Human PWP1 ELISA Kit甘酸鈣
KB抑制蛋白激酶α/β抗體Human PWP2 ELISA KitDL-酸乙酯鹽酸鹽
注意事項(xiàng):
1、操作過(guò)程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開(kāi)加。
2、反應(yīng)過(guò)程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測(cè)量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。