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上海紀寧試劑有限公司
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閱讀:228發布時間:2013-5-13
哈爾濱醫科大學*臨床學院科研人員利用小神經球傳代方法在體外培養神經干細胞,可在10個月時間內傳代25代,從單一的細胞擴增至10萬個細胞。目前,這一方法已在哈醫大衛生部細胞移植重點實驗室普遍應用,并已發表多篇學術論文。
臨床上,脊髓損傷后的軸突再生和功能恢復仍是難以逾越的障礙,對傷者而言脊髓損傷的破壞性是嚴重和持久的。目前,很多學者對發育的干細胞培養和應用潛力有著濃厚的研究興趣,因為這些細胞可以提供神經元,神經元細胞作為再生軸突的靶點,能促進神經環路的重建。
哈醫大神經外科梁鵬博士在國家自然科學基金的支持下,利用小神經球傳代方法建立的神經干細胞體外長期培養傳代系統,證實在細胞傳代和誘導分化時,將干細胞增殖形成的神經球消化成小的含10~20個細胞的小神經球,可明顯提高細胞的體外存活能力和增殖能力。利用小神經球傳代方法在體外可培養神經干細胞達到10個月,傳代25代,從單一的細胞可擴增至10萬個細胞。多次傳代后細胞凍存對細胞的存活力無明顯影響,多向分化潛力表現出穩定性。生長曲線顯示,細胞數量在經過了很多次傳代后始終呈指數擴增狀態,為神經干細胞的研究和移植提供了大量細胞來源。
在此基礎上,課題組還成功建立了神經干細胞小神經球脊髓斷端多點移植技術,利用神經球移植到大鼠橫切的脊髓斷端,觀察截癱恢復情況。研究發現,小神經球脊髓移植大鼠在體外和受傷大鼠脊髓內誘導分化的神經元,顯著高于傳統的神經干細胞懸液移植法,細胞存活率顯著增加。應用神經示蹤技術,證實受傷大鼠脊髓皮質脊髓束再生,并和遠端神經元之間建立了突觸。與之相一致的是,脊髓損傷后截癱大鼠后肢運動功能也得到了明顯改善。
課題組還進一步明確了神經干細胞對脊髓損傷的修復機制。這些機制主要包括:促進受傷神經元軸突的再生延長和再髓鞘化,以及脊髓損傷后神經環路的重建;在國內外提出人胚神經干細胞對脊髓損傷存在與先前研究不同的修復機制,即神經干細胞在移植治療脊髓疾病時,除了細胞替代效果外,還可通過營養支持,即細胞基質的作用,促進神經環路的再通。
專家認為,該研究成果擴充了神經干細胞的來源,為脊髓損傷神經干細胞移植治療帶來了良好的前景。
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