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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2019-02-18 10:06:35瀏覽次數(shù):592次
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全程ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)(從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。)
人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit Human EGF R ELISA Kit
EGF R,表皮細(xì)胞生長因子受體。EGF是一種作用較廣的促有絲分裂原,具有多種生物學(xué)功能。它與細(xì)胞膜上的EGF R結(jié)合后,通過受體自磷酸化、激活蛋白G和磷酸脂酶C等一系列生化反應(yīng),促進(jìn)糖酵解及蛋白質(zhì)、RNA和DNA的合成,從而促使細(xì)胞分裂的增殖。所提供的EGF RISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(EGF RISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit操作流程示意:?
上海撫生“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit優(yōu)勢如下:
1)*抗體——高效、靈敏、特異
2)規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3)*的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4)適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5)可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
試劑和樣本的控制方法:
一、人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證”,每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時(shí),可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
操作步驟:
1、人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
12、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
以下是人表皮細(xì)胞生長因子受體(EGF R)Elisa Kit的詳細(xì)介紹,點(diǎn)擊了解更多Human ELISA Kit。
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