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小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
試劑準備:
1. 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa KitMouse immunoglobulin M, IgM ELISA Kit
免疫球蛋白 M(immunoglobulin M, IgM), 五類免疫球蛋白分子中分子量大的一種。其分子量為900000道爾頓,故又稱為巨球蛋白。在正常小鼠血清中平均濃度為60~180mg%,約占血清總免疫球蛋白的6%。主要存在于血管中,對防止菌血癥起主要作用。一個IgM分子由5個單體通過J鏈連接成五聚體。這種結構使IgM具有較多的抗原結合價,可以同時和數個靶細胞結合。因此,IgM在機體抗感染免疫中起主力抗體的作用。IgM的抗菌作用比IgG高1000倍。在種系發育過程中,IgM是出現的免疫球蛋白。所提供的ELISA Kit是典型的競爭法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為抗鼠IgM抗體,檢測相為HRP標記鼠IgM。樣品和HRP標記鼠IgM同時加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測蛋白呈反相關。
產品名稱 | 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit |
英文名稱 | Mouse immunoglobulin M, IgM ELISA Kit |
規格 | 48T/96T |
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公司采用小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit的全是進口原材料研,發靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
樣本處理及要求:
1. 小鼠免疫球蛋白M(IgM)Elisa Kit血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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