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試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一,但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。撫生生物目前市售的一些試劑具有抗干擾作用,主要是通過(guò)加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。但值得注意的是:一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。1 試劑空白試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。
*鋅看,Bacitracin zinc每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類(lèi)物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、*等檢測(cè)試劑會(huì)因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。撫生生物這些情況均可使空白吸光度升高。*氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng),在放置過(guò)程中其試劑空白吸光度會(huì)因NADH自行氧化為NAD+而下降。
反應(yīng)中抗Vc干擾問(wèn)題:由于*易氧化,樣品中Vc會(huì)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)生成的過(guò)氧化氫,而產(chǎn)生負(fù)干擾。上海撫生生物因此,在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶,這種方法是有效的,但不一定有很大的意義。因?yàn)閂c干擾必須同時(shí)具備二個(gè)條件:看,Bacitracin zinc
a)Vc攝入量較多;b)采血后立即測(cè)定。實(shí)驗(yàn)表明離體血清中Vc在90 min后會(huì)全部被氧化。
又如,使用胺類(lèi)新色原。
分子共軛結(jié)構(gòu)特性使得靈敏度提高,相應(yīng)可以減少樣本用量,zui終能有效地降低干擾物的量.
b)使生成胺類(lèi)色素原zui大吸收峰由500~520 nm移至550 nm以上,以避開(kāi)黃疸、溶血干擾。如:亞鐵一H 0 ,能有效避免黃疸干擾的理論依據(jù)是亞鐵與H。0。親和力遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于*。甘油三酯測(cè)定,有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油,這個(gè)方法是可行的,但忽視了一個(gè)化學(xué)平衡理論。因?yàn)樗械孽ピ谒芤褐卸疾皇呛?jiǎn)單地以酯的形式存在,而是以水解與酯化相平衡的形式存在。撫生生物 在一個(gè)平衡體系中,如果去除游離甘油,這個(gè)平衡就向生成甘油方向移動(dòng),甘油三酯就會(huì)重新水解,生成新的甘油,達(dá)到新的平衡,因此樣品與R1試劑孵育時(shí)間越長(zhǎng),測(cè)得甘油三酯值就越低。
甘油三酯測(cè)定,不僅要去除游離甘油,而且還要克服樣本含量真實(shí)性發(fā)生的變化,試劑中必須加入甘油激酶,并且延遲時(shí)間要標(biāo)準(zhǔn)化。所以,一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。
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