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更新時間:2016-03-23 21:24:05瀏覽次數(shù):295次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)免疫學(xué)技術(shù)正沿著基礎(chǔ)研究-應(yīng)用研究-高技術(shù)開發(fā)研究3條主線在開展,上海撫生生物乳腺癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)正推動著技術(shù)平臺的發(fā)展。
乳腺癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟(jì),不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。
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Anti-GAP-43 ( Growth associated protein-43 )??神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43(抗體)
Anti-GAPDH (Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )??3-磷酸甘油醛脫氫酶
Anti-GAPDH (Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )humanAnti-GAPDH (Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )human??3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)
Anti-GAPDH (Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )rat、mouse??3-磷酸甘油醛脫氫酶(大鼠、小鼠)
Anti-GAPDH(Mouse Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) (暫無現(xiàn)貨)??3-磷酸甘油醛脫氫酶(小鼠來源) (暫無現(xiàn)貨)
Anti-GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )??3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來源免疫組化用抗體)
Anti-GASR(Gastrin receptor)??G蛋白偶聯(lián)受體-2抗體
Anti-Gastrin(Bombesin)??胃泌素/蛙皮素抗體
Anti-Gastrin(Bombesin)??胃泌素/蛙皮素
Anti-Gax(growth arrest-specific homeobox)??生長終止特異性同源盒基因抗體
Anti-GCS (glucosylceramide synthase, GCS)??*半*γ合成酶抗體
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?br /> (2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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