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聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 智慧城市網(wǎng)線粒體促凋亡蛋白抗體經(jīng)過(guò)*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。
線粒體促凋亡蛋白抗體動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得,因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高??梢?jiàn)該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),不過(guò),腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn),故而用SPF級(jí)小鼠。線粒體促凋亡蛋白抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時(shí),皮膚有緊張感,即可用16號(hào)針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測(cè)定抗體效價(jià),分裝,-70℃凍存?zhèn)溆?,或凍干保存?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊:超微量ATP酶測(cè)試盒(Na+K+、Ca2+Mg2、T-ATP酶) 200管/50樣 盒 比色法 520
100管/25樣 盒 比色法 320
乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)全血) 50管/48樣 盒 紫外比色法 300
50管/48樣 盒 可見(jiàn)光比色法 300
乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)血清、組織等) 50管/48樣 盒 比色法 250
乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法 290
50管/24樣 盒 比色法 160
蘋(píng)果酸脫氫酶測(cè)試盒(測(cè)血清) 50管/48樣 盒 紫外比色法 350
蘋(píng)果酸脫氫酶測(cè)試盒(測(cè)組織) 50管/48樣 盒 紫外比色法 300
琥珀酸脫氫酶(SDH)測(cè)試盒 50管 盒 比色法 240
肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 240
*酯酶(CHE)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 70
乙酰*酯酶(T-CHE)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 150
丁酰*酯酶測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 150
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 200
*(VE)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 130
*(VC)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法 150
*1(V B1)測(cè)試盒 50管 盒 比色法 面議
*2(V B2)測(cè)試盒 50管 盒 比色法 面議
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 100
b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法 260
體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng),又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段,即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多,細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng),單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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