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上海撫生實業有限公司
多藥耐藥相關蛋白2抗體經過*實踐已經發展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
多藥耐藥相關蛋白2抗體 動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 多藥耐藥相關蛋白2抗體
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。
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human ras homolog gene family,memmber B,RHOB 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)
human hypothetical protein LOC677340 人假定蛋白LOC677340
human hypothetical protein LOC433328 人假定蛋白LOC433328
human myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88 人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)
human interferon activated gene 205,Ifi205 人干擾素活化基因205(Ifi205)
human Histocompatibility 2-K1-K region,H2-K1 人組織相容性2-K1-K 區(H2-K1)
human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)
human C-type lectin domain family 4 member e,CLEC4E 人C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)
human Hypothetical protein LOC677168 人假定蛋白LOC677168
human lymphocyte antigen 6 complex locus A,Ly6a 人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)
human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1,EAR1 人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)
human mixed lineage kinase domain-like,MLKL 人混合系列蛋白激酶樣結構域(MLKL)
human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)
human similar to cDNA sequence BC027382 人類似cDNA順序BC027382
human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因
human REST corepressor 3,RCOR3 人REST協阻抑因子3(RCOR3)
Human collectin sub-family member 11,COLEC11 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)
Human α1β glycoprotein,α1β-GP 人α1β糖蛋白(α1β-GP)
Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sTREM-1 人可溶性髓系細胞觸發受體-1(sTREM-1)
體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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