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上海撫生實業有限公司
肝細胞生長因子抗體經過*實踐已經發展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
肝細胞生長因子抗體動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 肝細胞生長因子抗體 A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。
公司產品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊: human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)
human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,GSK2 ISA KIT 人血清/糖皮質激素調節激酶2(GSK2)
human mitogen activated protein kinase kinase 6,MKK6 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)
human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP 人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶(PDXP)
Human T-cell specific GTPase,Tgtp 人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)
Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 人法尼基二磷酸法尼基轉移酶1(FDFT1)
Human D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH 人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)
Human α1-Antitrypsin,α1-AT 人α1抗*(α1-AT)
Human Kallikrein 1,KLK 1 人*1(KLK 1)
Human Phosphorylated acetyl CoA,PaCoA 人磷酸化乙酰*(PaCoA)
Human phosphoglycerate mutase 2,PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)
Human Prostaglandin D synthase,PTGDS 人前列腺素D合成酶(PTGDS)
Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1,PPIL1 人肽酰脯氨酰異構酶(親環蛋白)樣1(PPIL1)
Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3,MAPKAPK3 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)
Human Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ 人血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACEⅠ)
Human Aprotinin,AP 人*(AP)
(2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。
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