丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得，因此使用的動物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟(jì)，不過，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動物病毒的危險，故而用SPF級小鼠。 丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體 A、材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。
B、方法：a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時，皮膚有緊張感，即可用16號針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d. 將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測定抗體效價，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀４妗?br /> 公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點擊： human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase 人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶（UGCG）
human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 人凋亡相關(guān)半*肽酶4（Casp4）
human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 人吡哆醛/吡哆醇*6激酶（PDXK）
human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 人二氫嘧啶酶樣2（DPYSL2）
human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,GSK2 ISA KIT 人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2（GSK2）
human mitogen activated protein kinase kinase 6,MKK6 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6（MKK6）
human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP 人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶（PDXP）
Human T-cell specific GTPase,Tgtp 人T細(xì)胞特異性鳥苷三磷酸酶（Tgtp）
Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1（FDFT1）
Human D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH 人D-乳酸脫氫酶（D-LDH）
Human α1-Antitrypsin,α1-AT 人α1抗*（α1-AT）
Human Kallikrein 1,KLK 1 人*1（KLK 1）
Human Phosphorylated acetyl CoA,PaCoA 人磷酸化乙酰*（PaCoA）
Human phosphoglycerate mutase 2,PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2（PGAM2）
Human Prostaglandin D synthase,PTGDS 人前列腺素D合成酶（PTGDS）
Human peptidylprolyl isomerase（cyclophilin）-like 1,PPIL1 人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶（親環(huán)蛋白）樣1（PPIL1）
Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3,MAPKAPK3 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3（MAPKAPK3）
Human Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ 人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACEⅠ）
Human Aprotinin,AP 人*（AP）
Human Caspase 12,Casp-12 人胱天蛋白酶12（Casp-12）
Human Protein kinase A,PKA 人蛋白激酶A（PKA）
Human A Disintegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 人解整合素樣金屬蛋白酶10（ADAM10）
Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 人基質(zhì)金屬蛋白酶11（MMP11）
Human thymidylate synthetase,TS 人胸苷酸合成酶（TS）
Human thymidinephosphorylase,TP 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶（TP）
（2） 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴細(xì)胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng)，又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段，即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多，細(xì)胞存活時間越長，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。
