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上海撫生實業有限公司
神經節肽抗體“甘丙肽"經過*實踐已經發展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。
神經節肽抗體“甘丙肽”動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 神經節肽抗體“甘丙肽” A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存備用,或凍干保存。
公司產品詳情請參閱有關詳細論述鏈接點擊: Human α-Endomorphin,α-EP 人α-內*肽(α-EP)
Human tumor marker DR-70 for lung cancer,DR-70TM 人肺癌標志物DR-70(DR-70TM)
Human fetal sulfoslycoprotein antigen,FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)
Human Bence-Jones protein,BJP 人本周蛋白(BJP)
Human Carcinoembryonic Ferritin,CEF 人癌胚鐵蛋白(CEF)
Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg 人鱗狀細胞癌相關抗原(SCCAg)
Human tumor specific antigen,TSA 人腫瘤特異性抗原(TSA)
Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM 人黑色素瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)
Human breast cancer susceptibility protein 2,BRCA-2 人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)
Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)
Human Bcl-2 associated X protein, Bax 人Bcl-2相關X蛋白(BAX)
Human Transfer factor,TF 人轉移因子(TF)
Human Colon Cancer Antigen,CCA 人結腸癌抗原(CCA)
Human H-ras 人H-ras
(2) 體外培養單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養,又可以進行懸浮培養。雜交瘤細胞的單層細胞培養法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養瓶中,以含10-15%小牛血清的培養基培養,細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養。單位體積內細胞數量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。 神經節肽抗體“甘丙肽”
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