通信電纜 網(wǎng)絡(luò)設(shè)備 無(wú)線(xiàn)通信 云計(jì)算|大數(shù)據(jù) 顯示設(shè)備 存儲(chǔ)設(shè)備 網(wǎng)絡(luò)輔助設(shè)備 信號(hào)傳輸處理 多媒體設(shè)備 廣播系統(tǒng) 智慧城市管理系統(tǒng) 其它智慧基建產(chǎn)品
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:付小姐查看聯(lián)系方式
更新時(shí)間:2016-03-17 22:24:37瀏覽次數(shù):340次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 智慧城市網(wǎng)免疫學(xué)技術(shù)正沿著基礎(chǔ)研究-應(yīng)用研究-高技術(shù)開(kāi)發(fā)研究3條主線(xiàn)在開(kāi)展,上海撫生生物*蛋白激酶受體A2抗體正推動(dòng)著技術(shù)平臺(tái)的發(fā)展。
*蛋白激酶受體A2抗體單克隆抗體的免疫抗原,從純度上說(shuō)雖不要求很高,但高純度的抗原使得到所需單抗的機(jī)會(huì)增加,同時(shí)可以減輕篩選的工作量。因此,免疫抗原是越純?cè)胶茫瑧?yīng)根據(jù)所研究的抗原和實(shí)驗(yàn)室的條件來(lái)決定。
熒光素標(biāo)記
異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記FITC標(biāo)記抗體的原理是在堿性條件下,F(xiàn)ITC 的異硫氰基能與IgG的自由氨基結(jié)合,形成IgG與熒光素的結(jié)合物。FITC是zui常用的熒光素,其次選用TRITC(四甲基異硫氰酸羅丹明)。FITC和TRITC是常用的雙標(biāo)記組合。*蛋白激酶受體A2抗體其標(biāo)記步驟如下:
以碳酸鹽緩沖液(PH9.3,Na2CO3 8.6g,NaHCO3 17.3g,蒸餾水1000ml)調(diào)整抗體濃度至10mg/ml。
b. 取5ml抗體溶液置于10ml小燒杯中。
c. 稱(chēng)取1mg FITC溶于0.2ml DMSO中,待溶解后立即緩慢滴加于抗體液內(nèi),邊加邊輕攪;其后室溫避光作用2小時(shí)。
d. 將交聯(lián)物經(jīng)Sephadex G25或G50柱層析除去游離的熒光素;分管收集*峰為標(biāo)記的抗體。
e. FITC的結(jié)合物質(zhì)量鑒定IgG量(mg/ml)=(OD280-OD495×0.35)/1.4F/P=2.87×OD495/(OD280-OD495×0.35),一般說(shuō),F(xiàn)ITC對(duì)抗體的摩爾比為3:1時(shí)適合于組織切片染色,為5-6:1時(shí)適合于細(xì)胞懸液染色。以標(biāo)記抗體染色各種抗原,測(cè)定其特異性染色滴度和非特異染色的程度。
f. 標(biāo)記抗體的保存:宜保存于4℃,加NaN3防腐。
B、 異硫氰酸羅丹明(TRITC)標(biāo)記: 基本與FITC標(biāo)記相同。
公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊: Rat C-Reactive Protein,CRP 大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)
Rat Tissue Polypeptide Antigen,TPA 大鼠組織多肽抗原(TPA)
Rat Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)
Rat Tissue factor,TF 大鼠組織因子(TF)
Rat Vitamin D,VD 大鼠*(VD)
Rat Vitamin K1,VK1 大鼠*1(VK1)
Rat Vitamin B12,VB12 大鼠*12(VB12)
Rat Vitamin D3,VD3 大鼠*3(VD3)
Rat Vitamin D2,VD2 大鼠*2(VD2)
Rat Vitamin E,VE 大鼠*(VE)
Rat Vitamin A,VA 大鼠*(VA)
Rat β-Thromboglobulin,β-TG 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)
Rat Plaet Factor 4,PF-4 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)
Rat Dihydrotestosterone,DHT 大鼠雙氫睪酮(DHT)
Rat connective tissue growth factor,CTGF 大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)
同位素標(biāo)記
必須強(qiáng)調(diào)的是在使用同位素標(biāo)記單抗或其他蛋白之前,應(yīng)掌握同位素操作和防護(hù)知識(shí)。正常情況下應(yīng)包括避免物理的接觸和對(duì)γ-射線(xiàn)照射的有效保護(hù),操作和使用同位素標(biāo)記抗體時(shí),應(yīng)利用防護(hù)裝置,并合理處置含放射性的廢料。
碘標(biāo)記用碘標(biāo)記抗體是一種有效的標(biāo)記方法。125I衰變產(chǎn)生低能的γ和Χ射線(xiàn),很容易被檢測(cè)出來(lái),而其60天的半衰期保證足夠的有效使用期,且能很方便地處理放射廢料。zui常用的碘標(biāo)記方法是氯胺T法,即將氧化劑氯胺T加入到抗體和碘化物的溶液中,Na125I在氯胺T作用下I轉(zhuǎn)化成I2,游離I2可與抗體分子中*和一些*發(fā)生鹵化反應(yīng),用還原劑和游離*終止反應(yīng),經(jīng)凝膠過(guò)濾將標(biāo)記的抗體與碘化*及還原劑分離開(kāi)。其主要操作步驟如下:
a. 在進(jìn)行標(biāo)記之前,先選用截流分子量為20000-50000的凝膠,制備1ml凝膠柱,然后分別用10倍體積的1%BSA/PBS/0.02%疊氮鈉和PBS洗滌柱體,封住柱下口,備用。
b. 加入10ug純化單抗至含有25ul 2.5mol/L磷酸鈉(PH7.5)的1.5ml指形管內(nèi)。隨后,加入500uCi Na125I混勻。
c. 加入25ul新配制的2mg/ml氯胺T。室溫放置60秒。再加入50ul氯胺T終止液(含2.4mg/ml偏重亞硫酸鈉,10mg/ml*,10%甘油和0.1%環(huán)乙烷酰二甲苯的PBS)。
d. 將上述碘標(biāo)記物上樣在凝膠柱表面,小心放開(kāi)柱體下口,用1.5ml指形管收集。當(dāng)?shù)鈽?biāo)記物全部進(jìn)入柱體,加入0.3ml含0.03%疊氮鈉的PBS,用另一指形管收集0.3ml,然后再加0.3ml 0.03% NaN3 PBS,下口收集0.3ml,重復(fù)進(jìn)行,同時(shí)用同位素檢測(cè)儀測(cè)定標(biāo)記與未標(biāo)記的單抗。標(biāo)記抗體大約在第二至第四管出現(xiàn)。無(wú)害化處理柱子和非單抗標(biāo)記部分。e. 將標(biāo)記單抗保存于4℃可使用6周時(shí)間。
B、 生物合成法標(biāo)記將雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)在含有放射性前體的培養(yǎng)基中,隨著抗體分子的合成、組裝,同位素會(huì)標(biāo)記在抗體分子的初級(jí)氨基酸鏈上,本方法不會(huì)導(dǎo)致抗體活性的喪失。其主要步驟是:
離心收集處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞,約需2×106個(gè)細(xì)胞。以預(yù)熱37℃不含*的培養(yǎng)基洗滌上述細(xì)胞。
b. 用含2% PBS不含*的培養(yǎng)基懸浮雜交瘤細(xì)胞至106個(gè)/ml,加入35S*(每次加入100uCi可產(chǎn)生105-106cpm的抗體)。
c. 經(jīng)C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過(guò)夜,離心后,吸出培養(yǎng)上清,分別加入1/20體積的1mol/L Tris(PH8.0)及疊氮鈉至濃度0.02%。該標(biāo)記抗體可按純化單抗方法進(jìn)行。
您感興趣的產(chǎn)品PRODUCTS YOU ARE INTERESTED IN
商鋪:http://cchxqp518.com/st58991/
主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒,水檢測(cè)試劑儀器,放免試劑盒,美國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)品,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,sigma原裝試劑,實(shí)驗(yàn)室耗材設(shè)備,胎牛血清
智慧城市網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作,未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ?
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
請(qǐng)輸入你感興趣的產(chǎn)品
請(qǐng)簡(jiǎn)單描述您的需求
請(qǐng)選擇省份
聯(lián)系方式
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司