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更新時間:2016-01-10 01:04:33瀏覽次數(shù):494次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)膜粘連蛋白-A抗體經(jīng)過*實踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟,在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。
膜粘連蛋白-A抗體動物體內(nèi)單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內(nèi)單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內(nèi),在小鼠腹腔內(nèi)生長雜交瘤,并產(chǎn)生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經(jīng)濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。膜粘連蛋白-A抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?span style="color: #ff0000">(2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養(yǎng),又可以進行懸浮培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品詳情請參閱有關(guān)詳細論述鏈接點擊: Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)
Human Endothelial lipase,EL 人內(nèi)皮脂肪酶(EL)
Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α 人橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )
Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 人骨成型蛋白7(BMP-7)
Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 人25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)
Human Leukotriene B4,LT-B4 人白三烯B4(LTB4)
Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)
Rat nitric oxide,NO 大鼠一氧化氮(NO)
Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)
Human adiponectin,ADP 人脂聯(lián)素(ADP)
human Histamine,HIS 人組胺(HIS)
human Resistin 人抵抗素(Resistin)
雜交瘤細胞的單層細胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細胞數(shù)量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產(chǎn)量就越大。
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