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脂聯(lián)素抗體

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所  在  地上海市

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更新時間:2015-12-26 07:06:59瀏覽次數(shù):742次

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聯(lián)系人:付小姐 (銷售)

產品簡介

脂聯(lián)素抗體經過*實踐已經發(fā)展的相當成熟,在免疫學診斷中的應用也相當廣泛。

詳細介紹

 脂聯(lián)素抗體動物體內單抗的方法迄今為止,通常情況下均采用動物體內單抗的方法,鑒于絕大多數(shù)動物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細胞與同品系的脾細胞融合而得,因此使用的動物當然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細胞接種于小鼠腹腔內,在小鼠腹腔內生長雜交瘤,并產生腹水,因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見該法操作簡便、經濟,不過,腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),因此在很多情況下要提純后才能使用,而且還有污染動物病毒的危險,故而用SPF級小鼠。 脂聯(lián)素抗體A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液體石蠟。c. 處于對數(shù)生*的雜交瘤細胞。
B、方法:a. 腹腔接種降植烷或液體石蠟,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接種用PBS或無血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 間隔5天后,每天觀察小鼠腹水產生情況,如腹部明顯膨大,以手觸摸時,皮膚有緊張感,即可用16號針頭采集腹水,一般可連續(xù)采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 將腹水離心(2000r/min 5分鐘),除去細胞成分和其他的沉淀物,收集上清,測定抗體效價,分裝,-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀4妗?span style="color: #ff0000"> (2) 體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講,雜交瘤細胞系并不是嚴格的貼壁依賴細胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以進行單層細胞培養(yǎng),又可以進行懸浮培養(yǎng)。
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卵黃高鹽瓊脂基礎
Egg-Yolk Salt Agar Base
抗生素5號
Antibiotic No.5
MUG培養(yǎng)基
MUG Medium
真菌瓊脂培養(yǎng)基
Fungi Agar Medium
磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基
Phosphate Glucose Peptone Water Medium
甲基紅指示劑盒
胰蛋白胨水培養(yǎng)基
Peptone Water Medium
Kovacs氏靛基質試劑盒
Differentia Reinforced Clostridial Agar
  雜交瘤細胞的單層細胞培養(yǎng)法是各個實驗室zui常用的手段,即將雜交瘤細胞加入培養(yǎng)瓶中,以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng),細胞濃度以1×106-2×106/ml為佳,然后收集培養(yǎng)上清,其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然,這種方法制備的單抗量極為有限,無疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗,就必須進行雜交瘤細胞的大量(高密度)培養(yǎng)。單位體積內細胞數(shù)量越多,細胞存活時間越長,單抗的濃度就越高,產量就越大。


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