細(xì)胞名稱 小型豬腎細(xì)胞；MPK

形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長特性 貼壁

特征特性 該細(xì)胞對單純皰疹性病毒、牛腹瀉病毒等敏感。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS

傳代方法 1:2-1:3，每周換液2-3次

傳代情況

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

01116-201001

50mg 非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ 供檢查用 101121-201001

50mg 非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ 供檢查用 101122-201001

50mg 氨基三乙酸 供HPLC法 101123-201001

30mg 2-巰基* 供檢查用 101124-201001

100mg 1,3-丙二醇 供檢查用 101126-201001

50mg 可的松 供HPLC法 101128-201001

50mg * 供檢查用 101132-201001

20mg 消旋山莨菪堿雜質(zhì)I（阿托酸6β-羥基-3α-托品酯） 供HPLC含量 101135-201001

50mg 硫唑嘌呤雜質(zhì) 供檢查用 101138-201001

50mg 10-甲氧基-4-（1-甲基-4-哌啶基）-4H-苯并[4.5]環(huán)庚[1.2-b]噻吩-4-醇（富馬酸酮替芬雜質(zhì)Ⅰ） 供HPLC法系統(tǒng)適用性 101141-201001

100mg 5-硝基糠醛二乙酸酯 供TCL檢查用 101142-201001

100mg 氫后馬托品 供鑒別用 101143-201001

50mg 反式帕羅西汀 供檢查用 101144-201001

50mg 去氟帕羅西汀 供檢查用 101145-201001

50mg N-甲基帕羅西汀 供檢查用 101146-201001

50mg 4-羥基苯甲酸 供檢查用 101149-201001

50mg 4-羥基間苯二甲酸 供檢查用 101150-201001

50mg 丙戊酸鎂 供GC法含量 101151-201001

50mg 二甲氧芐啶 供檢查用 101152-201001

100mg 間甲酚 供GC法含量 101153-201001

100mg 對甲酚 供GC法含量

游離睪酮

ASD ELISA Kit  大鼠雄烯二酮

E3 ELISA Kit  大鼠雌三醇

17-OHP ELISA Kit  大鼠17羥孕酮

T3 ELISA Kit  大鼠甲狀腺原氨酸

T4 ELISA Kit  大鼠甲狀腺素

FT4 ELISA Kit  大鼠游離甲狀腺素

Free-T3 ELISA Kit  大鼠游離*狀腺原氨酸

NN-T4 ELISA Kit  大鼠新生甲狀腺素

INS ELISA Kit  大鼠胰島素

C-Peptide ELISA Kit  大鼠C肽

CG ELISA Kit  大鼠絨毛膜促性腺激素

LH ELISA Kit  大鼠促黃體激素

AMA ELISA Kit   大鼠抗心肌抗體

ACA ELISA Kit  大鼠抗中性粒/中心體抗體

小型豬腎細(xì)胞；MPKPI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit  大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM

CPSA ELISA Kit  大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原

trypsin ELISA Kit   大鼠胰蛋白酶

IFN- Beta/IFNB ELISA Kit  大鼠

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。