乙酰輔-酶A活性測(cè)試盒(三羧酸循環(huán)類)

產(chǎn)品規(guī)格 : 100管/96樣

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

測(cè)試方法：微量法

產(chǎn)品包裝：液體盒裝

運(yùn)輸條件：快遞包郵

應(yīng)用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

供 應(yīng) 商： 上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司

測(cè)定意義：

乙酰廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個(gè)樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經(jīng)過這條通路*氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰是合成脂肪酸，酮體，及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。

測(cè)定原理：

蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰和草酰乙酸生成檸檬酸。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯(lián)反應(yīng)，乙酰含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反應(yīng)了乙酰含量的高低。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

注   意 ：

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

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試劑的組成和配制：

試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×1支，-20℃保存。臨用前加入250μL試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；

-試劑三：液體10uL×1支，4℃保存。臨用前加入250μL試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；

試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加入22.5mL試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；

試劑五：液體30mL×1瓶，4℃保存。

工作液的配制：臨用前請(qǐng)根據(jù)擬用工作液體積（樣本數(shù)×0.23 m L），將試劑二、三和四按照1:1:90的比例混合，或者直接把試劑二和試劑三加入到試劑四中混勻（可以測(cè)定96樣）；加樣前置37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴鍋中預(yù)熱30 min；現(xiàn)配現(xiàn)用；