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上海紀寧生物原代細胞的培養方法

時間:2023/8/11閱讀:352
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上海紀寧生物原代細胞能反映體內生長特性,適宜用于細胞分化等實驗研究。

原代細胞的培養,也叫初代培養,是從供體取得組織細胞在體外進行的培養,是建立細胞系的第一步,是一項基本技術。

原代細胞的培養方法一般有以下4種:

① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

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原代細胞的培養條件:

一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

3、 胎牛血清濃度為10%-80%;

4、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

5、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

6、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

7、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

二、懸浮細胞培養

1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

3、細胞濃度可在4-6X105/ml范圍內,進行分瓶試驗;

4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

上海紀寧實業有限公司的企業宗旨是“以誠信為本,原代細胞質量是企業的生命"誠信是經營的資本為警醒,嚴苛把關所售出商品的質量,保證售出產品質量之的。歡迎來詳詢訂購!

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