ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包含板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及穿插反響性、回收率等。假如試驗(yàn)君常常開(kāi)展ELISA試驗(yàn),主張運(yùn)用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然條件是試驗(yàn)條件的一致性)。關(guān)于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產(chǎn)廠家運(yùn)用的抗體對(duì)、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研制實(shí)力不盡相同,天然不同廠家試劑盒測(cè)出的數(shù)據(jù)會(huì)有差異。
一、依據(jù)樣品中檢測(cè)物水平來(lái)挑選試劑盒
假如試驗(yàn)君關(guān)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參閱的數(shù)據(jù),挑選寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)規(guī)模的試劑盒。假如樣品中待檢物的含量很低,主張?zhí)暨x高靈敏度的試劑盒。為了下降基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。假如樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過(guò)試劑盒的檢測(cè)規(guī)模(標(biāo)曲規(guī)模), 也需做恰當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在計(jì)算結(jié)果時(shí),需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
二、供貨商資質(zhì)評(píng)價(jià)
縱觀國(guó)內(nèi)外ELISA試劑盒供貨商,“柏君"估計(jì)至少100余家。有些供貨商可供給數(shù)百種常用目標(biāo)ELISA,然而有些供貨商則聲稱(chēng)可供給數(shù)千種乃至上萬(wàn)種目標(biāo)的試劑盒,但質(zhì)量參差不齊,更有濫竽充數(shù)禍患科研之輩。那假如挑選供貨商呢?
1、從同行或試驗(yàn)室同僚了解供貨商的口碑,售前售后的處理狀況。
2、查詢(xún)供貨商的網(wǎng)站具體了解相關(guān)目標(biāo),可查詢(xún)這些目標(biāo)是否現(xiàn)已開(kāi)宣布特異性抗體?假如查遍全球連抗體都還不行獲取,又怎么開(kāi)宣布ELISA試劑盒呢? 第3、尤其是SCI期刊文章對(duì)供貨商產(chǎn)品的引證。
4、了解供貨商的研制前史和品牌史,許多供貨商一再替換公司名或替換公司注冊(cè)地,其間名堂試驗(yàn)君應(yīng)該能悟出。不要迷信國(guó)外“品牌",國(guó)外“品牌"。許多打著國(guó)外旗幟的公司,其實(shí)就是空殼的皮包公司,從全球OEM殘次產(chǎn)品。國(guó)外供貨商也有售后不給力的時(shí)分。
三、依據(jù)樣本可獲得性來(lái)挑選試劑盒
一般而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供貨商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。假如您的樣品很寶貴或較難獲取,則需求仔細(xì)考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。假如樣品量少,ELISA試劑盒且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需慎重。