當前位置:上海紀寧實業有限公司>>技術文章>>ELISA試劑盒測定操作簡便
因此,每一批號的ELISA試劑盒板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA試劑盒板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度。
1、切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3、在吸取液體時,ELISA試劑盒要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4、務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5、樣品稀釋液應用加液器加注,ELISA試劑盒并經常校對其準確性。
6、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG 工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG 工作液。
8、ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
現在ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室運用時對所供應的濃縮液稀釋制作,因而稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前暫時制作。
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