使用ELISA檢測試劑盒進行試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應。
在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：
固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg/ml。
除此之外還要注意以下事項：
1.確定ELISA檢測試劑盒在有效期內；
2.仔細閱讀說明書；
3.按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)；
4.標本制備要規范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內無法實驗者，注意低溫保存；
5.根據檢測標本數量確定所需試劑的量；
6.準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等；
7.按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。
在ELISA檢測試劑盒試驗時我們注意了這樣實現相信都能夠得到比較滿意的結果！
