土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-微量法正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

土壤芳基硫酸酯酶來自于土壤微生物，能酶促土壤有機硫化物轉化為植物可吸收的無機態硫，在硫素的生物化學循環和植物的硫營養代謝中具有重要的作用，是反映土壤質量的一個重要生物學指標。

測定原理：

S-ASF 能夠催化對-硝基苯硫酸鉀生成對-硝基苯/酚，后者在 410nm 有特征光吸收。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-微量法試劑組成和配制：

試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存（自備）；試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 1.25mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存;

試劑四：液體 5mL×1 瓶，4℃保存； 試劑五：液體 20mL×1 瓶，4℃保存； 樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-微量法測定步驟：

振蕩混勻，使土樣全部濕潤，室溫放置 15min

混勻， 37℃水浴 1h 后

充分混勻，室溫靜置 2min 后，10000g 25℃離心 10min，取 200μL 上清液于 410nm 處測定吸光值 A，計算 ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。

土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-微量法活力計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.0066x -0.013；x 為標準品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1 μmol 對-硝基苯/酚定義為一個酶活力單位。

S-ASF 活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0066×V 反總÷W÷T =19.09×(ΔA+0.013)

T：反應時間，1h=1/24d；V 反總：反應體系總體積：2.625×10-4 L；W：樣本質量，0.05g。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.0033x -0.013；x 為標準品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1 μmol 對-硝基苯/酚定義為一個酶活力單位。

S-ASF 活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0033×V 反總÷W÷T =38.19×(ΔA+0.013)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體系總體積：2.625×10-4 L；W：樣本質量，0.05g。