土壤幾丁質(zhì)酶試劑盒-可見(jiàn)分光光度法注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲(chóng)等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)

胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測(cè)定原理

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生 N-乙酰氨基葡萄糖，進(jìn)一步與對(duì)二甲氨基苯甲/醛產(chǎn)生紅色化合物，在 585nm 處有

特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、水浴鍋、離心機(jī)、震蕩儀、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿，甲苯、蒸餾水。

土壤幾丁質(zhì)酶試劑盒-可見(jiàn)分光光度法試劑組成和配制

試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 50mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣品處理

新鮮土樣風(fēng)干，過(guò) 30-50 目篩。

土壤幾丁質(zhì)酶試劑盒-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定操作表

土壤幾丁質(zhì)酶試劑盒-可見(jiàn)分光光度法計(jì)算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=5.2714x-0.0007，R2=0.9989；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL），y 為吸光值 ΔA。

酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生 1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V 反總÷W÷T×1000

= 598×（ΔA +0.0007）

V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.63mL；W：樣本質(zhì)量，0.2g；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；1000：1mg/mL=1000μg/mL

注意事項(xiàng)

1． 試劑一充分混勻后再使用。