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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 萊爾生物 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
規格:50T/24S
產品內容:
試劑一:液體 65mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;
產品說明:
S-LAP 是一類能水解肽鏈 N-末端為亮氨/酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
S-LAP 分解 L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算 S-LAP 活性。
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒自備實驗用品及儀器:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
S-LAP測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 405nm,蒸餾水調零。
2、在試劑二瓶中加入 30mL 試劑一充分溶解(如較難溶解,可 60℃水浴加熱約 30min 促進溶解);在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
3、操作表
試劑名稱 | 對照管 | 測定管 |
新鮮土樣(g) | 0.2 | 0.2 |
試劑一(μL) | 1200 | |
試劑二(μL) | 1200 |
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒混勻, 37℃振蕩反應 1h 后,8000g 4℃離心 10min,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 處測定吸光值 A,計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。
S-LAP 活力單位的計算:
單位的定義:每天每 g 土樣每天生成 1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
S-LAP(μmol/d /g 土樣)=ΔA×V 反總÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V 反總:反應體系總體積,1.2×10-3 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm; d:比色皿光徑,1cm;T:反應時間,1h=1/24d; W:樣本質量,0.2g。
注意事項:
土壤亮氨/酸氨基肽酶(S-LAP)試劑盒當?A 大于 1 時,建議將上清液稀釋后進行測定;當?A 小于 0.01 時,建議延長反應時間。計算公式中注意乘以稀釋倍數或注意反應時間變化。
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