土壤多酚氧化酶(PPO)試劑盒-微量法注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：粉劑×1 瓶，臨用前加入 12mL 蒸餾水，用不完的試劑仍 4℃保存； 試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：yi醚，4℃保存(自備) ；

標(biāo)準(zhǔn)液：液體 10mL×1 瓶，重鉻酸鉀溶液（2.55mmol/L），相當(dāng)于 0.1mg/mL 紫色沒食子素溶液。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：

用 0.5mol/L HCL 溶液將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋至 0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0mg/mL。

土壤多酚氧化酶(PPO)試劑盒-微量法產(chǎn)品說明：

S-PPO 主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘?bào)w分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、礦物等物質(zhì)反應(yīng)生成有機(jī)質(zhì)和色素，完成土壤芳香族化合物循環(huán)，用于土壤環(huán)境修復(fù)。

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生紫色沒食子素，后者在 430nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、yi醚（不允許快遞）、冰和蒸餾水。

土壤多酚氧化酶(PPO)試劑盒-微量法操作步驟：

1、可見分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 430nm，蒸餾水調(diào)零。

2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：取 0.2mL 稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)液于比色皿或 96 孔板中在 430nm 處測定吸光值 A，根據(jù)吸光度（x）和濃度（y，mg/mL）做出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3、樣本測定表

振蕩數(shù)次，室溫靜置 30min，蒸餾水調(diào)零，取 200μL 上層液于 430nm 處測定吸光值 A。注意：yi醚易揮發(fā)，轉(zhuǎn)移至酶標(biāo)板時(shí)建議一次性不要測定太多樣本。

土壤多酚氧化酶(PPO)試劑盒-微量法S-PPO 活性計(jì)算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將樣品吸光值 A 帶入公式中（x），計(jì)算出樣品濃度 y（mg/mL）。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 紫色沒食子素定義為一個(gè)酶活力單位。

S-PPO（mg/d/g 土樣）＝y(tǒng)×V 提取相÷W÷T =516×y

T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d；V 提取相：提取相總體積，0.43mL；W ：樣品質(zhì)量，0.02g。