土壤蔗糖酶（S-SC）檢測試劑盒說明書，正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

S-SC 能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體吸收，其酶促作用產物與土壤中有機質、氮、磷含量，微生物數量及土壤呼吸強度密切關，是評價土壤肥力的重要指標。

測定原理：

S-SC 催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與 3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范圍內 510nm 光吸收增加速率與S-SC 活性成正比。

自備實驗用品及儀器：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

土壤蔗糖酶（S-SC）檢測試劑盒試劑組成和配制：

試劑一：甲苯 1mL×1 瓶，4℃保存；（自備）試劑二：液體 7.5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 22mL 蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑 4℃保存；

試劑四：液體 22mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

測定步驟和加樣表：

振蕩混勻，使土樣全部濕潤，37℃水浴 15min

充分混勻，放入 37℃水浴培養 24 小時，10000 g，4℃，離心 5min，取上清液

土壤蔗糖酶（S-SC）檢測試劑盒充分混勻，95℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻，蒸餾水稀釋 10 倍（可以吸取 100μ  L，加入 900μ  L 蒸餾水稀釋；若吸光度大于 4，可以加大稀釋倍數），取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔板中 510nm 處讀吸光值 A。計算 Δ A=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設一個對照管。

S-SC 活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 4.9x -0.062；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值。單位的定義：每天每g 土樣中產生 1mg 還原糖定義為一個S-SC 活力單位。

S-SC 活力(mg/d/g 土樣)=( Δ A+0.062) ÷4.9×10×V 反總÷W÷T =20.4×(Δ A+0.062)

10：稀釋倍數；T：反應時間，1d； V 反總：反應體系總體積：0.3mL；W：樣本質量，0.03g。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

土壤蔗糖酶（S-SC）檢測試劑盒標準條件下測定的回歸方程為y = 2.45x -0.062；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值。單位的定義：每天每g 土樣中產生 1mg 還原糖定義為一個S-SC 活力單位。

S-SC 活力(mg/d/g 土樣)=( Δ A+0.062) ÷2.45×10×V 反總÷W÷T =40.8×(Δ A+0.062)

10：稀釋倍數；T：反應時間，1d； V 反總：反應體系總體積：0.3mL；W：樣品質量，0.03g。