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規格 | 50T/100T | 儀器 | 分光光光度計/酶標儀 |
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運輸 | 常溫 | 保質期 | 三個月 |
品牌 | 合肥萊爾生物科技有限公司 | 訂購方式 | 聯系客服 |
保存 | 按說明書 | 貨期 | 現貨 |
土壤木質素過氧化物酶(S-Lip)檢測試劑盒說明書,注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
木質素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質素降解酶系,在木質素生物降解、造紙工業、紡織工業、芳香化合物轉化與降解及環境污染控制等方面具有較大的應用潛力。
測定原理:木質素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,在 310nm 處有特征吸收峰。
土壤木質素過氧化物酶(S-Lip)檢測試劑盒自備實驗用品及儀器:天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)。
試劑組成和配制:
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 6mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存。
樣品處理:
新鮮土樣風干,過 30-50 目篩。
測定操作:
| 對照管 | 測定管 |
土樣(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μ L) | 30 | 30 |
25℃靜置 15min | ||
試劑一(μ L) |
| 100 |
蒸餾水(μ L) | 100 |
|
試劑二(μ L) | 60 | 60 |
試劑三(μ L) | 40 | 40 |
30℃震蕩反應 3h,冰浴 5min,10000g,4℃離心 10min,取上清 150μ L,于微量石英比色皿/96 孔板,測定 310nm 處吸光值,分別記為 A 對照和 A 測定,△A=A 測定- A 對照 |
土壤木質素過氧化物酶(S-Lip)檢測試劑盒酶活計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol 藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土樣)=
DA
e ´ d
×V 反總÷W÷T= 172×△A÷W
ε :藜蘆醛摩爾消光系數:9300L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應總體積,0.2mL;
W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol 藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP 活性(nmol/d /g 土樣)=
DA
e ´ d
×V 反總÷W÷T= 344×△A÷W
土壤木質素過氧化物酶(S-Lip)檢測試劑盒ε :藜蘆醛摩爾消光系數:9300L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V 反總:反應總體積,0.2mL; W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
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