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藥敏試驗培養基的選擇對藥敏結果的影響因素
閱讀：24 發布時間：2025-1-8藥敏試驗培養基的選擇具有一定的原則和要求，不以個人經驗或愛好而更改。為了使臨床試驗和醫療保健服務水平具備一致的標準，許多國家或機構制定了不同的參照標準。由于參照標準有所差異，故藥敏培養基的要求也有所不同。我國藥敏試驗結果判斷標準參照美國CLSI標準文件，則要求除了特殊菌群，K-B法所用的培養基必須是M-H培養基；英國參照的標準BSAC則要求培養基為ISO培養基，而M-H營養瓊脂只適用于葡萄球菌的藥敏試驗。因此在工作中，我們要嚴謹的參照CLSI，根據不同菌群的需求選擇合適、正確的藥敏培養基。
培養基的成分和質量是保證藥敏結果準確性的先決條件。培養基對藥敏結果的影響因素具體如下：
1、pH：pH的變化可導致抑菌圈直徑變大或變小。
2、能拮抗菌藥活性的物質：如鈣、鎂離子能降低氨基糖苷類藥物的抗菌活性。
3、厚度：標準厚度為4mm,厚度>4mm，抑菌圈則會變小，<4mm,則會變小。
4、濕度：使用藥物平皿前一般先在室溫平衡半個小時，使培養基表面干燥，濕度過高不利于細菌的生長或對抗菌藥起到稀釋作用。
5、硬度：硬度過高不利于抗菌藥在瓊脂中的擴散，可導致抑菌圈直徑變小。
6、營養條件：營養條件太差不利于細菌的生長，抑菌圈直徑變大；反之，培養及營養條件太好會讓抑菌圈直徑變小。
將這些原理和原則解說后，針對他們對話中的問題，我一一進行了剖析：
根據CLSI，絕大多數細菌藥敏試驗瓊脂均為標準的M-H瓊脂，M-H瓊脂基本不含有抑制磺胺類藥物和四環素類藥物抗菌活性的物質，可滿足大多數細菌的生長需要，腸球菌對營養要求不高且生長速度較快，因此可選用M-H瓊脂（MHA），而不是血平皿。對于大多數細菌，MHA是不需要添加羊血，血液或血清中的蛋白會不同程度結合抗菌藥分子，影響了抗菌藥物的活性，如羊血中的某些成分可抑制磺胺類藥物和四環素類藥物抗菌活性，同時也可影響新生霉素、萘夫西林及頭孢菌對腸球菌的藥敏結果。
溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌等營養要求高的苛養菌則需要使用M-H瓊脂+5%脫纖維羊血培養基，也叫M-H藥敏試驗血瓊脂平板（MHBA）。MHBA與普通的分離細菌的血平板或者哥倫比亞血平板（CNA）雖然長相相似，但配方及產業標準（如pH、濕度等）均不一樣，是不能相互代替使用的。為了比較肺炎鏈球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培養基上的藥敏結果，在其他條件均一致的情況下我們分別用MHBA和CNA做了藥敏試驗，結果發現，CNA的藥敏結果抑菌圈直徑偏大，細菌生長情況較差，從而導致“假敏感"結果。
因此，作為一名合格的微生物檢驗人員，我們應該時刻遵守操作規程，牢記標準要求，熟讀規則原理，杜絕含糊不清、似是而非，才能確保結果的準確性。