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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-25 09:56:30瀏覽次數(shù):231次
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恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1價(jià)格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性獼猴的肺組織。1985年*昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
APT(Human Abnormal prothrombin) ELISA Kit 人異常*原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-RCC1 染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh H5N1 Hemagglutinin A型流感病毒H5N1凝集素抗體 規(guī)格 1ml
VEGFR-2/Flk-1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2 96T
phospho-PRKD1(Ser738) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 0.1ml
BRPF3 英文名稱: BRPF3蛋白抗體 0.2ml
Anti-RCC1 染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Cofilin/CFL1 (Tyr139) 磷酸化絲切蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗人C3-純化抗體 1mg/10mg 國(guó)產(chǎn)
phospho-YWHAE(Thr232) 英文名稱: 磷酸化14-3-3E蛋白抗體 0.1ml
DOK5 英文名稱: 胞漿接頭蛋白Dok5抗體 0.2ml
Anti-4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-ER- Alpha(phospho-S167)/FITC 熒光素標(biāo)記抗人磷酸化雌激素受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Muc2/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C1orf129 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體 規(guī)格 0.2ml
Tanis/SELS (Selenoprotein S)又稱SELS 炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白(抗原) 0.5mg
HEATR6 英文名稱: 癌增強(qiáng)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RPS3 核糖體蛋白S3抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Muc2/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Megsin/SER—PINB7 /FITC 熒光素標(biāo)記*(或半*)蛋白酶抑制劑B7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TLR6/CD286/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K5) 乙酰化組蛋白H4抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗*抗體IgG 0.1ml
GPR31 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體31抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Biotin/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗*抗體IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-TLR6/CD286/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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