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上海撫生實業(yè)有限公司
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更新時間:2018-04-25 09:50:03瀏覽次數(shù):337次
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非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO價格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO價格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO價格
形態(tài)特性 上皮樣,多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性 Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的Yasumura Y和Kawakita Y從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細(xì)胞常作為轉(zhuǎn)染宿主,用于支原體的檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
Anti-IL-22/ZCYTO18/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-22抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANT-1/ATP carrier protein 1/Adenine Nucleotide Translocase 1 腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase 英文名稱: 葡萄糖-6磷酸脫氫酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM 兔抗人IgM 規(guī)格 1mg
Anti-Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-E-Selectin/CD62E E選擇素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HBZ/Hemoglobin ζ 血紅蛋白ζ鏈抗體 規(guī)格 0.2ml
AlphaHBDH(Mouse Alpha-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit 小鼠α羥基丁酸脫氫酶 96T
PIBF 英文名稱: 孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體 0.2ml
Blood Group Lewis a 英文名稱: 血型Lewis A抗原抗體 0.2ml
Anti-E-Selectin/CD62E E選擇素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿菌O6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-MR/FITC 熒光素標(biāo)記鹽皮質(zhì)激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C20ORF141 20號染色體開放閱讀框141抗體 規(guī)格 0.2ml
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素 0.1mg
HDL 英文名稱: 高密度脂蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh S100A11 S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-MR/FITC 熒光素標(biāo)記鹽皮質(zhì)激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Mfn1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體融合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACE1/CD143 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/PE PE標(biāo)記的兔抗*抗體IgG 0.1ml
GPR58 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體58抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml
Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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