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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-17 12:30:03瀏覽次數(shù):585次
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人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T-24品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T-24品牌
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來源于病人的轉(zhuǎn)移性細(xì)胞腺癌。有移行細(xì)胞癌的病人的白細(xì)胞和血清對(duì)T24和相關(guān)細(xì)胞株有細(xì)胞毒性。該細(xì)胞戲的倍增時(shí)間約為19小時(shí)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640(含2mM L-glutamine) (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:16,18;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:20,23;D3S1358:16;D5S818:10,12;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:17,22;TH01:6;THOX:8,11;vWA:15,17;
同工酶 無
染色體 62-69
使用權(quán)限 A類
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T-24品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-PIRH2/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG 兔抗大鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
糖原合酶激酶-3β抗體 Anti-GSK-3β 0.1ml
Dog IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM59A 英文名稱: FAM59A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG 兔抗大鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Follistatin human 人卵泡抑素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CNTF 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Notch1/MOTC 跨膜受體蛋白Notch-1抗體 規(guī)格 0.1ml
Human gelson ELISA Kit 人凝膠原蛋白 96T
TMED4 英文名稱: 跨膜蛋白TMED4抗體 0.2ml
C6ORF173 英文名稱: 6號(hào)染色體開放閱讀框173抗體 0.2ml
Anti-CNTF 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-CD150/SLAM/FITC 熒光素標(biāo)記CD150抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Recomb Protein G 重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
整合素-β3抗體 Anti-ITG-β3/CD61 0.1ml
MCT4 英文名稱: 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋4抗體 0.2ml
Phospho-FGFR1 (Tyr307) 英文名稱: 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 規(guī)格 0.1ml
Recomb Protein G 重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIAT1 海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
AT- III ELISA Kit 大鼠抗*Ⅲ抗體 96T
PLRP1 英文名稱: 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
C2CD4D 英文名稱: C2CD4D蛋白抗體 0.2ml
Anti-PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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