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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-17 12:28:59瀏覽次數(shù):577次
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人肝癌細(xì)胞;Huh-7價(jià)格冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人肝癌細(xì)胞;Huh-7價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞;Huh-7價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 此細(xì)胞產(chǎn)甲胎蛋白,*α抗體,血漿銅藍(lán)蛋白,纖維蛋白原,纖維粘連蛋白等。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:10;D16S539:10;D18S51:15;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:11;D8S1179:14,15;FGA:22,23;TH01:7;THOX:8,11;vWA:16,18;
同工酶 無
染色體 52-68
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
Anti-SREBP-1/FITC 熒光素標(biāo)記*調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白酶活化受體4/前列腺細(xì)胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗體 Anti-PAR4 0.1ml
SPINK1/SPINK3 英文名稱: 相關(guān)*抑制劑1抗體 0.1ml
EXTL3 英文名稱: 多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Ser529) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
sVEGFR2/sFLK-1(truncated soluble vascular endothelial growth factor receptor 2)human 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCID1 PCID1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
IL20RA Kit Human 人 IL20RA / IL20R1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TMEM106B 英文名稱: 跨膜蛋白106B抗體 0.2ml
CDK1 英文名稱: 周期素依賴激酶1抗體 0.1ml
Anti-Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-RELMa/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素樣分子α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
BSA(標(biāo)準(zhǔn)) 血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn))Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
巨噬細(xì)胞表面分子/整合素-α2抗體 Anti-Integrin αM/CD11b 0.1ml
SRD5A2 英文名稱: 類固醇5α還原酶2抗體 0.1ml
FAM50C 英文名稱: FAM50C蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKC delta (Ser645) 磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 規(guī)格 0.1ml
BSA(標(biāo)準(zhǔn)) 血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn))Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Anti-phospho-PAK2(pSer141)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化p21激活激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
FoxP1抗體 anti-FoxP1 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
phospho-FMRP (Ser500) 英文名稱: 磷酸化脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT3 (Tyr705) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 規(guī)格 0.1ml
Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
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