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上海撫生實業(yè)有限公司
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品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時間:2018-04-17 11:20:42瀏覽次數(shù):202次
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人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源于一位25歲的白種男人,分離自接受*前由肺癌轉(zhuǎn)移到的胸膜積液中。可用作轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3品牌的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
Anti-Pdk4/FITC 熒光素標(biāo)記丙酮酸脫氫酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
抗子宮內(nèi)膜抗體 anti-EMAb 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
FADD 英文名稱: Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr231) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
cyclin D1 周期素D1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHB5 原鈣粘蛋白β5抗體 規(guī)格 0.2ml
CD97 Kit Human 人 CD97 ELISA配對抗體 ELISA
TNRC6B 英文名稱: 三核苷酸重復(fù)蛋白6B抗體 0.2ml
COPS2 英文名稱: 甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體 0.2ml
Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌株)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
神經(jīng)束蛋白-155 Anti-Neurofascin-155 0.2ml
Synaptotagmin XII 英文名稱: 突觸結(jié)合蛋白12抗體 0.2ml
EGF 英文名稱: 表皮生長因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
IL-2sR Alpha/CD25(Human soluble interleukin-2 receptor) ELISA kit 人白介素2可溶性受體α鏈Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG 小鼠抗IgG 規(guī)格 1mg
AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人水通道蛋白1 96T
RbAp48 英文名稱: 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48抗體 0.2ml
CLPS 英文名稱: 胰輔脂酶抗體 0.2ml
Anti-GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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