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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-13 11:45:03瀏覽次數(shù):306次
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SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB1.19品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB1.19品牌報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB1.19品牌
形態(tài)特性
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 在0.6mg/ml*G418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然的胎兒四肢組織,建立了此細(xì)胞系。 在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。 這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。 這些細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化,造骨細(xì)胞生理和激素,生長(zhǎng)因子,和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
規(guī)格:96T/48T大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T大鼠游離β絨毛膜*(f-βCG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat free chorionic gonadotropin,f-βCG ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
規(guī)格:96T/48T大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人腦血管平滑肌細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管周細(xì)胞英文名稱:HBVP*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:HCPEC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞英文名稱:HCPEpiC *規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞英文名稱:HCPF*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦膜細(xì)胞英文名稱:HMC*規(guī)格:5 x 10^109 cells/vial
Anti-TRAIL/Apo2L /FITC 熒光素標(biāo)記壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SARS S-protein(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
*激酶A.B.C抗體 Anti-TrK A.B.C 0.2ml
SPON2/ 英文名稱: 細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體 0.2ml
EMX2 英文名稱: 空通氣孔樣蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser332/336) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml
SARS S-protein(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) 磷酸化5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CK18(Ser74) 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗小鼠IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
XPB 英文名稱: DNA損傷修復(fù)酶ERCC3蛋白抗體 0.2ml
DCN/Decorin 英文名稱: 核心蛋白聚糖抗體 0.1ml
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) 磷酸化5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Humen IFN- Alpha 人α-干擾素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
anti-CIB1 鈣整合素結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NUAK2 SNF1/AMP激酶相關(guān)激酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
rTaq DNA Polymerase 重組Taq DNA 聚合酶 10,000 ul
CD90 / Thy1 英文名稱: CD90抗體 0.1ml
C9orf172 英文名稱: 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體 0.2ml
anti-CIB1 鈣整合素結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
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