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大鼠Ⅲ型前膠原肽 ELISA檢劑盒操作步驟

閱讀：141發布時間：2018-12-18

大鼠Ⅲ型前膠原肽 ELISA檢劑盒操作步驟：


1、加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、孔、待測樣品孔。在酶標包被板上品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘。
7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉)。
8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


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