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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:342發(fā)布時(shí)間:2018-11-16
如果用濃度較高的*消化液消化細(xì)胞過長時(shí)間會(huì)破壞細(xì)胞膜,殺死細(xì)胞。如果不確定*的使用濃度,請用較低濃度。細(xì)胞類型、細(xì)胞密度、培養(yǎng)基中血清的濃度,都決定了細(xì)胞從培養(yǎng)表面分離的時(shí)間。*的作用時(shí)間應(yīng)該在一個(gè)小值。
1)將培養(yǎng)液從培養(yǎng)瓶中吸出,用不含鈣鎂離子的鹽溶液洗滌細(xì)胞,再將溶液吸出。
2)在培養(yǎng)瓶中加入足夠的*消化液,覆蓋單層細(xì)胞,置于37度培養(yǎng)箱中大約2分鐘,或者直到80%細(xì)胞變圓(顯微鏡觀察)。
3)吸出消化液,將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱1min。
4)立即加入中和液(貨號(hào)0113)或者含有血清的培養(yǎng)液,抑制*的作用,避免細(xì)胞損傷。
5)輕輕吸出懸浮液收集細(xì)胞,可以做稀釋,如果需要可以做細(xì)胞計(jì)數(shù)或接種。
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