一、讓競爭ELISA方法起到*作用
ELISA試劑盒的英文名稱是ELISA KIT，它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
IL-elisa檢測試劑盒可以利用競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗 *抗原。檢測時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，*抗體及酶標(biāo)記物，包被抗原和加入樣本中的*競爭性地與*抗體結(jié)合后，再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物，用TMB底物顯色；加入反應(yīng)終止液，在450nm波長酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測，樣品中的*濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
二、冬季ELISA實(shí)驗(yàn)也要做保溫
1. 為何要保溫？
因?yàn)镋LISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。
2. 保溫的方式有哪些咧？
除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴：
① 可將ELISA試板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。
② 為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。
③ 若用保溫箱，應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA板放在濕紗布上。
④ 濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。
⑤ 無論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。
⑥ 室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求控制溫育。
⑦ 室溫溫育時(shí)，只要平置于操作臺(tái)上即可。
⑧ 應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。
⑨ 為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定。
三、實(shí)驗(yàn)中的回溫平衡
在加樣之前約半小時(shí)左右，把試劑盒從冰箱中取出，放置在室溫下進(jìn)行平衡，平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時(shí)間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進(jìn)行快速回溫。
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